新規RNA結合タンパク質によるアポトーシス誘導の分子機構

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15390100
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 秋山 徹 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (70150745)
• Keywords: p53 / TGF-β / アポトーシス / RNA結合蛋白質 / 標的遺伝子 / ノックアウトマウス / TPA / 発現誘導

Research Abstract

TGF-βシグナルの標的遺伝子として見出した新規遺伝子D8のアポトーシス誘導における作用機構および個体レベルでの生理機能を明らかにすることを目的として研究を進め、以下の結果を得た。
1)D8の発現はTGF-βのみでなくp53, TPAなどによっても誘導されることを明らかにした。
2)D8の発現誘導がp53によるアポトーシス誘導に重要であることを示唆する実験結果を得た。
3)D8をbaitとしたyeast two-hybrid法および抗D8抗体による免疫沈降物の質量分析による解析から複数のD8結合蛋白質候補を同定した。実際に細胞内での結合を確認し、結合の生理的意味を明らかにすべく研究を続けている。
4)D8結合RNAを検索し複数の候補RNAを見出した。
5)D8発現の調節機構を明らかにするためD8プロモーターを単離し、プロモーター解析を開始した。
6)ノックアウトマウス作成のためのターゲッティングベクターを作成した。
7)D8ファミリーの各cDNA全長を単離し全構造を明らかにした。
8)D8ファミリーについてもノックアウトマウス作成のためのゲノム単離を進めた。

Research Products

• [Publications] Y.Kawasaki: "Mutated APC and Asef are Involved in Migration of Colorectal Tumor Cells."Nature Cell Biology. 5・3. 211-215 (2003)
• [Publications] T.Okabe: "RICS, a novel GTPase-Activating Protein for Cdc42 and Rac1, is involved in the β-catenin-N-cadherin and NMDA receptor signaling.β"J.Biol.Chem.. 278. 9920-9927 (2003)
• [Publications] S.Nada: "Identification of PSD-93 as a substrate for the Src family tyrosine kinase Fyn."J.Biol.Chem.. 278. 47610-47621 (2003)
• [Publications] H.Seo: "Incorporation of DUF/FACT into chromatin enhances the accessibility of nucleosomal DNA."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 303. 8-13 (2003)
• [Publications] T.Sekiya: "Identification of BMP and Activin Membrane-bound Inhibitor (BAMBI), an Inhibitor of Transforming Growth β-Catenin Pathway in Colorectal Tumorβ Signaling."J.Biol Chem.. 279. 6840-6846 (2004)
• [Publications] N.Kakinuma: "Candidate Regions of Tumor Supressor Locus on Chromosome 9q31.1 in Gastric Cancer."Int.J.Cancer. 109. 71-75 (2004)
• [Publications] A.Hirata: "PDZ domain-binding motif of human T-cell leukemia virus type 1 Tax oncoprotein augments the transforming activity in a rat fibroblast cell line."Virology. 318. 327-336 (2004)
• [Publications] K.Haraguchi: "Activation of beta-catenin-TCF-mediated transcription by non-receptor tyrosine kinase v-Src."Biochem Biophys Res Commun.. 313. 841-844 (2004)
• [Publications] T.Moriguchi: "DREG, a developmentally regulated G protein-coupled receptor containing two conserved proteolytic cleavage sites."Gnes Cells. (in press). (2004)
• [Publications] Y.Hirabayashi: "The Wnt-β-catenin pathway directs neuronal differentiation of cortical neural precursor cells."Development. (in press). (2004)
• [Publications] N.Kakinuma: "Improved In-Gel Competitive Reassociation technique can detect Epstein-Barr virus genome in gastric cancer."J.Electrophoresis. (in press). (2004)