2004 Fiscal Year Annual Research Report
外来・ベッドサイドで使用できる迅速SNP検出法「SNP-Strip」の開発と応用
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15390111
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| Research Institution | TOHOKU UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
松原 洋一 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (00209602)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
呉 繁夫 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (10205221)
鈴木 洋一 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80216457)
青木 洋子 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (80332500)
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| Keywords | 遺伝子診断法 / 遺伝子多型 / 遺伝子変異 / 薬物代謝酵素 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、私たちが独自に考案したSNP-Strip法を用いて、ベッドサイドで簡便・迅速にsingle nucleotide polymorphism (SNP)が検出できる遺伝子診断法を開発し、その臨床応用を検討することである。本年度は、以下のような研究を行った。薬理遺伝学的遺伝子多型については、ある薬剤の代謝に複数の遺伝子多型が関与していることも少なくなく、このような場合、遺伝子診断法のマルチプレックス化が望ましい。そこで私たちは、SNP-Strip法の最終検出ステップに、試験紙ではなくイムノアフィニティーとELISA法を組み合わせた新しい手法を開発した。ここでは、PCR反応液をチップ上のメンブレンに吸着させ、試薬を順次加えることによって青の発色で多型の有無を検出する。チップには特別の工夫が加えられており、添加された液はすべてメンブレン下部のパッドに吸収されるため、通常のELISAのように廃液を処理する必要がない。また、多数のチップをケースに収納することによってマルチウェルプレートのフォーマットで用いることも可能である。この方法(SNP-Strip-ELISA法)は、比較的高いスループットを持ちながら、特別の機器を用いることなく肉眼で遺伝子型を判定できるというこれまでにない特徴を有しており、今後多くの遺伝子診断に応用可能と考えられる。
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