2004 Fiscal Year Annual Research Report
異種移植における遅延型拒絶反応の抑制-補体制御と糖鎖抗原の改変-
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15390377
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
宮川 周士 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (90273648)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白倉 良太 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (00116047)
岡部 勝 遺伝情報実験施設, 教授 (30089875)
村上 博 日本動物工学研究所, 取締役研究部長
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| Keywords | 補体抑制因子 / DAF / MCP / 膜残存補体 / 糖鎖抗原 / α-Gal抗原 / ブタislet / α1,3GT活性 |
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| Research Abstract |
1、補体制御に必要な抑制因子の再検討。>DAF, MCPと膜型C1-INH(C1-INH-PI)をhybrid化し、C1+DAFおよびC1+MCPを作成した。発現ベクターpCXNに組み込みブタ血管内皮に発現させ、抗補体作用を比較検討した。
(1)、C1+DAFはDAF単独と比較し抗補体作用は同程度であったが、DAFではみられないC4の沈着抑制作用がみられた。
(2)、C1+MCPはMCP単独に比して明らかに抗補体作用がすぐれていた。また、C4及びC3の沈着抑制作用の増強がみられた。
2、α-Gal抗原後の糖鎖抗原の検討。>DAF+GnT-III発現、ホモα1,3GTのknockoutブタを作成した。この血管内皮を検討した。
(1)、HPLCでGnT-IIIの活性を認めた。
(2)、α1,3GT活性はヘテロでは2-3割減少したに過ぎないが、ホモでは感度以下=0をしめした。
(3)、同時に、ホモではGSI-B4で測定するとα-galの発現はほぼ0であった。
(4)、一方、ヒト血清に対する反応性は、GnT-IIIが同時に影響するにもかかわらず、15%程度残存した。
3、ブタisletの糖鎖抗原の解析。>賭場より新生児ブタを入手し、その新生児ブタのislet=ICCを分離し、9日間の培養に成功した。また、抗原性を検討した。
成ブタにはα-Galの発現およびα1,3galactosyltransferaseの活性がなかったが、ICCではα-Galの活性および発現を確認した。
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