2004 Fiscal Year Annual Research Report
ケラチノサイト増殖因子受容体を標的とした卵巣がんの新規分子標的治療薬の開発
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15390512
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
岡本 愛光 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (20204026)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山田 恭輔 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (30230452)
高倉 聡 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (60256401)
落合 和徳 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (20152514)
田中 忠夫 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (50110929)
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| Keywords | IDO / タキソール / 卵巣癌 / 卵巣上皮不死化細胞 / 低分子阻害剤 / cDNAマイクロアレイ |
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| Research Abstract |
(1)パクリタキセル(TXL)耐性遺伝子のスクリーニング
卵巣がん細胞株2008を用いTXL耐性株2株を樹立した。また患者の同意を得て採取された漿液性卵巣がんIIIc期手術検体でTXL不応症例4例およびTXL高感受性症例4例を選別した。全株、全症例よりtotal RNAを抽出し、約33,000遺伝子の発現プロファイリングを行った。Hierarchical clustering解析を行った結果TXL耐性群とTXL感受性群間で有意水準5%で発現差が認められた遺伝子は66種類であった。リアルタイムRT-PCRにより再現性が確認されたのはIDO (Indoleamine-2,3-dioxygenase)遺伝子を含む11種類であった。漿液性卵巣癌III-IV期症例28症例におけるIDO蛋白発現を免疫組織学的に検討し、染色パターンおよび強度を考慮したスコアリングを行った。その結果Kaplan-Meier解析によりスコアと予後に有意差をもって相関が認められた(p=0.0001)。以上よりIDOは漿液性卵巣癌におけるTXL耐性獲得能に関与し、IDO蛋白発現パターンは予後の指標となることが示唆された。
(2)正常卵巣上皮不死化細胞株および卵巣がん細胞株を用いたトランスフェクションアッセイ
インフォームドコンセントを得た3例の正常卵巣上皮にSV40Tag, hTERTを導入し、不死化細胞株を樹立した。卵巣細胞株2株とともにKGFR, IDO cDNAセンスをトランスフェクションし、クローンを得た。種々の抗がん剤感受性の変化や腫瘍原性の検討を行う予定である。
(3)KGFR低分子阻害剤のスクリーニング
KGFRのkinase Domainを大腸菌・昆虫細胞で発現させ、kinase活性のあるRecombinant proteinを得た。今後、約3万種類のKGFR低分子阻害剤のスクリーニングを行う予定である。
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