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2004 Fiscal Year Annual Research Report

筋萎縮性側策硬化症モデル動物に見られる不溶性SODの精製とその性状解析

Research Project

Project/Area Number 15500237
Research InstitutionOsaka Medical Center for Cancer and Cardiovasclar Diseases

Principal Investigator

宮本 泰豪  大阪府立成人病センター, 研究所, 主任研究員 (90322742)

Keywords筋萎縮性側策硬化症 / 脊髄 / 脳幹 / 不溶性 / SOD / 立体構造
Research Abstract

筋萎縮性側索硬化症モデルラット(mutant Cu,Zn SODトランスジェニックラット)の脳および脊髄のタンパク質を溶解度により3つに分画した(TBS可溶性画分、NP40可溶性画分、NP40不溶性画分)。mutant Cu,Zn SODは、脳および脊髄のTBS可溶性画分、NP40可溶性画分にほぼ均一に存在した。しかし、筋萎縮性側索硬化症で特異的に障害される脊髄および脳幹では、NP40不溶性画分にもmutant Cu,Zn SODは存在した。NP40不溶性画分に存在するmutant Cu,Zn SODは他の画分に存在するmutant Cu,Zn SODと比較して抗体に対するaffinityが増加、SOD活性は低下していた。これらのmutant SODを精製し質量分析計で解析すると、質量に差は認められなかった。また、wildおよびmutantSOD1(WT,A4V,G37R,H46R,G93A)をSf21昆虫細胞系で強制発現させ精製した。変異SODタンパクは3種類の抗ヒトCu/Zn-SODモノクローナル抗体(mAb)を用いたウエスタンブロット解析でほとんど検出されない。また、wild type SODタンパクはDTTや熱処理などによって3種のmAbとの反応性が増大していくのに対し、変異SODタンパクは反対に減少していく。これらのmAbはエピトープとしてGreek key loopを認識しており、mAbとの反応性の違いはGreek key loop部分の構造の違いや構造変化の差異を示すと考えられる。

  • Research Products

    (1 results)

All 2005

All Journal Article (1 results)

  • [Journal Article] Different immunoreactivity against monoclonal antibodies between wild-type and mutant copper/zinc superoxide dismutase linked to amyotrophic lateral sclerosis.2005

    • Author(s)
      Fujiwara N, Miyamoto Y, Ogasahara K, Takahashi M, Ikegami T, Takamiya R, Suzuki K, Taniguchi N.
    • Journal Title

      Journal of Biological Chemistry 280

      Pages: 5061-5070

URL: 

Published: 2006-07-12   Modified: 2016-04-21  

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