2004 Fiscal Year Annual Research Report
糖鎖を持つポリアニオンでコートしたDNA複合体による遺伝子ターゲティングシステム
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15500324
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| Research Institution | Otsuma Women's University |
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Principal Investigator |
小山 義之 大妻女子大学, 家政学部, 教授 (00162090)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 智子 大妻女子大学, 家政学部, 助手
柳衛 宏宣 東京大学, 先端科学技術研究センター, 特任助教授 (30212278)
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| Keywords | 遺伝子治療 / 三元複合体 / ポリアニオン / 転写 / HMGタンパク |
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| Research Abstract |
カルボキシル側鎖を持つPEG誘導体、PEG-Cに細胞接着性ペプチドRGDの側鎖を導入し、RGD-PEG-Cを合成した。Plasmid/ポリエチレンイミン/RGD-PEG-C三元複合体は、結成タンパクを含む緩衝液中でも高い安定性を示した。また、Plasmid/ポリエチレンイミン/RGD-PEG-C複合体による各種ライン化した細胞への遺伝子導入を試みたところ、RGD-PEG-CでコートしたPlasmid/ポリエチレンイミン複合体は、多くの腫瘍細胞に対してもとの二元複合体と比べて高い発現を示した。
一方、PEG-CをDNA/ポリカチオン複合体に加えることで、コンプレックスが緩和され、RNAポリメラーゼがアクセスしやすくなるのではなり、転写が活性化されるのではないかと考えた。そこで、各種の三元複合体の被転写効率をin vitroで比較検討してみたところ、DNA/ポリカチオン/PEG-C三元複合体ではPEG-Cが無い場合と比べて明らかに高い被転写効率を示すことが確認された。
この現象は、哺乳動物の細胞核内でHMGタンパクがヌクレオソームを弛緩し、転写を促進するのと類似した作用と思われる。そこで、よりHMGに似たモデル高分子として、アミノ基とカルボキシル基の両方を持つ両性イオン型高分子、PEG誘導体(PEG-A/C)を合成し、その転写効率への影響を調べてみた。その結果、DNA/ポリカチオン/PEG-A/C三元複合体は、PEG-A/Cが無い場合と比べてはるかに高い転写効率持つことが明らかになった。
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Research Products
(4 results)
