放射線適応応答でのp53を中心とした分子機構の解明

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15510047
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 立花 章 京都大学, 放射線生物研究センター, 助教授 (20188262)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤堂 剛 京都大学, 放射線生物研究センター, 教授 (90163948)
• Keywords: 放射線適応応答 / 低線量放射線 / 突然変異 / Hprt遺伝子 / multilex PCR

Research Abstract

低線量放射線を予め照射した細胞においてみられる放射線適応応答は、その後の高線量放射線照射による致死効果を軽減するとともに、染色体異常や突然変異の生成を低下させることが明らかにされている。放射線照射された細胞の核抽出液を用いた試験管内反応系を用いた解析から、放射線適応応答によりDNA鎖切断修復機構が何らかの修飾を受けていることを示唆する結果を得た。従って、放射線適応応答の少なくとも一部にはDNA2本鎖切断の修復が関与している可能性が考えられる。この点をさらに明らかにするために、細胞内遺伝子の突然変異スペクトルの解析を行った。マウスm5S細胞に放射線を照射し、6チオグアニン(6TG)抵抗性を指標としてHprt遺伝子に生じる突然変異頻度を検討したところ、予め2cGy照射後6Gy照射したcultureの突然変異頻度は、前照射なしに6Gy照射したcultureの突然変異頻度に比べてほぼ1桁低かった。マウスHprt遺伝子は9個のexonからなり、その全塩基配列は一昨年報告された。この配列情報と、我々がそれまでに既に明らかにしていた部分的配列情報とから、マウスゲノムHprt遺伝子の各exonを増幅するPCRプライマーを作成し、m5S細胞から得た6TG抵抗性突然変異体のHprt遺伝子を解析した。2cGy前照射後6Gy照射した細胞から得た突然変異体では、前照射なしに6Gy照射した細胞から得た突然変異体に比べて、Hprt遺伝子の部分欠失突然変異の占める割合が高く、突然変異スペクトルに違いが見られた。放射線適応応答は、誘発突然変異の頻度だけでなく、スペクトルにも何らかの影響を与えているものと考えられる。

Research Products

• [Publications] Naka, K., Tachibana, A., Ikeda, K., Motoyama, N.: "Stress induced premature senescence in hTERT-expressing ataxia telangiectasia fibroblasts"Journal of Biological Chemistry. 279(3). 2030-2037 (2004)
• [Publications] Koga, A., Iida, A., Kamiya, M., Hayashi, R., Hori, H., Ishikawa, Y., Tachibana, A.: "The medaka fish Tol2 transposable element can undergo excision in human and mouse cells"Journal of Human Genetics. 48(5). 231-235 (2003)