2006 Fiscal Year Annual Research Report
免疫電顕法によるユーグレナの光合成タンパク質分子の輸送経路の研究
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15570054
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| Research Institution | Nippon Sport Science University |
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Principal Investigator |
長船 哲斉 日本体育大学, 体育学部, 教授 (70074630)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大城 香 福井県立大学, 生物資源学部, 教授 (90101104)
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| Keywords | ユーグレナ / LHCPII / 免疫電顕法 / ゴルジ体 / 温度15℃ |
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| Research Abstract |
先に、免疫電子顕微鏡法によりユーグレナ(Euglena gracilis)の細胞核にコードされ細胞質で合成された光化学系II・集光性クロロフィルa/b結合タンパク質複合体分子(LHCPII)の葉緑体への輸送経路を追跡し、LHCPIIがゴルジ体を経由し葉緑体のチラコイド膜に組込まれる現象を明らかにした。今回は、さらにユーグレナ細胞を生体に近いといわれる急速凍結置換法を用いて細胞の固定方法について詳細な検討を行った。その結果、従来からユーグレナ細胞の急速凍結置換固定法は確立されていなかったが、われわれがユーグレナについて、初めて急速置換固定法の固定条件を確立した。ユーグレナ細胞の化学固定法からえられたLHCPIIがゴルジ体を通過し輸送される現象は、生体に近いとされる急速置換固定方法においてもLHCPIIの前駆体タンパク質のゴルジ体を経由することが確かめられた。ユーグレナのLHCPIIの動態を急速置換固定-免疫電顕法・連続超薄切片法を用いて、コンピュタグラフィクス画像解析装置による三次元像とタンパク質分子の三次元分布を再構築すると、ゴルジ体由来のゴルジ小胞が葉緑体包膜の3層構造の最外膜に融合する像が得られ、同時に経時的な追跡が可能になった。その後、免疫電顕法-コンピュタグラフィクス解析により、LHCPIIタンパク質分子が葉緑体の中間膜と内膜との接着面を分子が通過する像が観察された。次に、LHCPIIタンパク質分子の温度変化によるゴルジ体の通過阻害実験と放射性同位元素を用いて経時的に追跡した。LHCPIIの葉緑体への輸送経路を確かのものにした。
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[Book] 現代生命科学2007
Author(s)
長舩哲齊, 他
Total Pages
151
Publisher
芦書房
Description
「研究成果報告書概要(和文)」より
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