2003 Fiscal Year Annual Research Report

γ-グルタミルトランスペプチダーゼの活性中心の構造解析と反応機構

Research Project

Project/Area Number	15580061
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	鈴木秀之京都大学, 生命科学研究科, 助教授 (10202136)
Keywords	γ-グルタミルトランスペプチダーゼ / グルタチオン / 活性中心 / Ntn-ヒドロラーゼ
Research Abstract	大腸菌由来のγ-グルタミルトランスペプチダーゼはD体、L体いずれのγ-グルタミル化合物も基質とするが、D体に対するKm値はL体に対するKm値に比べて10倍ぐらい大きい値になった。このことは、α炭素に付いているアミノ基、カルボキシル基の両方を認識している残基が存在することを示している。γ-グルタミルトランスペプチダーゼのアミノ酸配列とクラスIVセファロスポリンアシラーゼのアミノ酸配列のホモロジーは高い。特にこれまでにアミノ酸配列が明らかになっているγ-グルタミルトランスペプチダーゼの間で、完全に保存されている残基はクラスIVセファロスポリンアシラーゼでもよく保存されている。そのうちの一つである大腸菌のγ-グルタミルトランスペプチダーゼの433番目の残基に当たるAsp-433に相当するヒトのγ-グルタミルトランスペプチダーゼ残基(Asp-423)は基質であるγ-グルタミル化合物のα位のアミノ基と相互作用して安定化させているととが示唆されていた(つまり、Asp-433は活性中心を形成する残基の一つと考えられた)。この残基はクラスIVセファロスポリンアシラーゼではアスパラギンであったので、D433N変異を導入したところ、GL-7-ACAアシラーゼ活性を持つようになり、γ-グルタミルトランスペプチダーゼをセファロスポリンアシラーゼに変換することに成功した。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] H.Suzuki, K.Kato, H.Kumagai: "Enzymatic synthesis of γ-glutamylvaline to improve the bitter taste of valine"J.Agric.Food Chem.. 52(3). 577-580 (2004)
[Publications] H.Minami, H.Suzuki, H.Kumagai: "γ-Glutamyltranspeptidase, but not YwrD, is important in utilizing extracellular glutathione as a sulfur source in Bacillus subtilis"Journal of Bacteriology. 186(4). 1213-1214 (2004)
[Publications] 南博道, 鈴木秀之, 熊谷英彦: "枯草菌のγ-グルタミルトランスペプチダーゼに関する研究"応用微生物学研究. 1(2). 109-114 (2003)
[Publications] H.Suzuki, S.Izuka, H.Minami, N.Miyakawa, S.Ishihara, H.Kumagai: "Use of bacterial γ-glutamyltranspeptidase for enzymatic synthesis of γ-D-glutamyl compounds"Appl.Environ.Microbiol.. 69(11). 6399-6404 (2003)
[Publications] H.Minami, H.Suzuki, H.Kumagai: "A mutant Bacillus subtilis γ-glutamyltranspeptidase specialized in hydrolysis activity"FEMS Microbiol.Lett.. 224(2). 169-173 (2003)
[Publications] H.Minami, H.Suzuki, H.Kumagai: "Salt-tolerant γ-glutamyltranspeptidase from Bacillus subtilis 168 with glutaminase activity"Enzyme Microb.Technol.. 32(3-4). 431-438 (2003)
[Publications] H.Suzuki, H.Kumagai: "Challenges in Taste Chemistry and Biology"American Chemical Society. 223-237 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

γ-グルタミルトランスペプチダーゼの活性中心の構造解析と反応機構

Principal Investigator

鈴木 秀之 京都大学, 生命科学研究科, 助教授 (10202136)

Research Products

[Publications] H.Suzuki, K.Kato, H.Kumagai: "Enzymatic synthesis of γ-glutamylvaline to improve the bitter taste of valine"J.Agric.Food Chem.. 52(3). 577-580 (2004)

[Publications] H.Minami, H.Suzuki, H.Kumagai: "γ-Glutamyltranspeptidase, but not YwrD, is important in utilizing extracellular glutathione as a sulfur source in Bacillus subtilis"Journal of Bacteriology. 186(4). 1213-1214 (2004)

[Publications] 南博道, 鈴木秀之, 熊谷英彦: "枯草菌のγ-グルタミルトランスペプチダーゼに関する研究"応用微生物学研究. 1(2). 109-114 (2003)

[Publications] H.Suzuki, S.Izuka, H.Minami, N.Miyakawa, S.Ishihara, H.Kumagai: "Use of bacterial γ-glutamyltranspeptidase for enzymatic synthesis of γ-D-glutamyl compounds"Appl.Environ.Microbiol.. 69(11). 6399-6404 (2003)

[Publications] H.Minami, H.Suzuki, H.Kumagai: "A mutant Bacillus subtilis γ-glutamyltranspeptidase specialized in hydrolysis activity"FEMS Microbiol.Lett.. 224(2). 169-173 (2003)

[Publications] H.Minami, H.Suzuki, H.Kumagai: "Salt-tolerant γ-glutamyltranspeptidase from Bacillus subtilis 168 with glutaminase activity"Enzyme Microb.Technol.. 32(3-4). 431-438 (2003)

[Publications] H.Suzuki, H.Kumagai: "Challenges in Taste Chemistry and Biology"American Chemical Society. 223-237 (2003)

鈴木秀之京都大学, 生命科学研究科, 助教授 (10202136)