2003 Fiscal Year Annual Research Report
石油の脱硫代謝における新規酵素群のタンパク質工学・分子遺伝学的研究による機能向上
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15580063
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
和泉 好計 鳥取大学, 工学部, 教授 (40026555)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大城 隆 鳥取大学, 工学部, 講師 (00233106)
田之倉 優 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (60136786)
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| Keywords | desuofurization / dibenzothiophene / Rhodococcus erythropolis / desulfinase |
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| Research Abstract |
石油中の難除去性含硫化合物ジベンゾチオフェン(DBT)は、石油の燃焼の際に亜硫酸ガスを生成し大気中に放出されて酸性雨の原因物質となることから近年特に注目を集めている.したがってDBTおよびその誘導体の微生物代謝、特に脱硫反応機構の解明の研究は極めて重要な課題である。今までに我々が明らかにしてきたDBTの高脱硫活性のRhodecoccus属細菌脱硫系の中で最終段階の酵素DszB(デスルフィナーゼ)は脱硫反応を触媒する新規酵素であり、またDszC、Aとカップルするフラビンレダクターゼは脱硫代謝に重要な役割を演ずる酵素である。そこで本研究では高効率脱硫プロセスの構築を目標してDszBの立体構造解明とそれに基づく活性、安定性および発現量の向上、およびフラビンレダクターゼの特性解明と効率的な脱硫代謝酵素系の構築を目的として、本年度は下記の成果を得た。
1)すでに高発現し酵素化学的特性を解明しているDszBの分子遺伝学的特性の解明と、結晶化を行った。
(2)(1)で得られたDszBの結晶酵素のX線構造解析を行った。
(3)好熱性非脱硫細菌のフラビンレダクターゼの精製、クローニングを行い、現在同時に高発現させつつある好熱性の脱硫菌由来DszC、Aとの共発現を行い高温域での脱硫反応の最適化を図った。
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[Publications] T.Kawai, T.Kubota, J.Hiraki, Y.Izunmi: "Biosynthesis of ε-poly-L-lysine in a cell-free system of Streptomyces albulus"Biochem.Biophys.Res.Commun. 311. 635-640 (2003)
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[Publications] 大城 隆, 和泉好計: "石油の硫黄・窒素・金属の除去"農芸化学の事典. 757-760 (2003)
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[Publications] 原 安夫, 小林健治, 和泉好計: "電解生成水によるズブチリシン,α-アミラーゼおよびリパーゼの活性化"日本食品科学工学会誌. 50. 563-569 (2003)
