2003 Fiscal Year Annual Research Report
転写因子E2F1によるp53ファミリー蛋白質p73の負の制御機構
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15590261
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| Research Institution | Chiba Cancer Center (Research Institute) |
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Principal Investigator |
尾崎 俊文 千葉県がんセンター(研究所), 生化学研究部, 上席研究員 (40260252)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川原 章 千葉県がんセンター(研究所), 生化学研究部, 部長 (50117181)
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| Keywords | p73 / E2F1 / NEDL2 / ubiquitination / p53 |
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| Research Abstract |
我々はCOS7およびSAOS-2細胞を用いた一過性の発現実験から、転写因子であるE2F-1がユビキチン系によるp73αの分解を誘導するとともに、p73αの転写活性化能を顕著に阻害することを見い出したが、この現象はH1299,U20S,H4およびA549細胞においても認められた。さらに、我々はE2F-1によるp73αの選択的分解がE2F-1の転写活性化能を必要とするかどうかを検討する目的で、E2F-1のカルボキシ末端領域に存在する転写活性化ドメインを欠失した変異体E2F-1(1-414)を構築した。複数のE2F-1結合配列を持つp73のプロモーター領域を用いたルシフェラーゼレポーター法によって、この変異体の転写活性化能が野生型に比べて著しく低下していることが認められた。COS7細胞を用いた実験から、E2F-1(1-414)はp73αに対する結合能を保持していることが明らかになったが、p73αの蛋白質量の減少は観察されなかった。一方、p73αの転写因子としての機能はE2F-1(1-414)によって著しく阻害された。従って、E2F-1によるp73αの分解誘導にはE2F-1の転写活性化能が必須であるが、一方E2F-1によるp73αの転写活性化能の阻害は分解とは異なる分子機構によって制御されている可能性が示唆された。また、我々はHECTドメインを持つ新規ユビキチンリガーゼであるNEDL2を同定した。NEDL2はp73のPYモチーフを標的として結合し、p73のユビキチン化を促進することが明らかになった。興味深いことに、NEPL2はp73の半減期を延長させるとともに、その転写活性化能を昂進させることが判明した。従って、p73のユビキチン化は必ずしも分解シグナルとして機能するのみならず、安定化のシグナルとしても機能しうることが示唆された。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Miyazaki, K., Fujita, T., Ozaki, T., et al.: "NEDL1, a novel E3 Ubiquitin ligase for dishevelled1, targets mutant super oxide dismutase 1."J.Biol.Chem.. 279. 11327-11335 (2004)
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[Publications] Miyazaki, K., Ozaki, T., et al.: "A novel HECT-type E3 ubiquitin ligase, NEDL2, stabilizes p73 and enhances its transcriptional activity."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 308. 106-113 (2003)
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[Publications] Nakagawa, T., Takahashi, M., Ozaki, T., et al.: "Negative auto regulation of p73 and p53 by DeltaNp73 in regulating differentiation and survival of human neuroblastoma cells."Cancer Lett.. 197. 105-109 (2003)
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[Publications] Okamoto, Y., Ozaki, T., et al.: "UbcH10 is the cancer-related E2 ubiquitin-conjugating enzyme."Cancer Res.. 63. 4167-4173 (2003)
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[Publications] Nakamura, Y., Ozaki, T., et al.: "Accumulation of p27^<KIP1> is associated with BMP2-induced growth arrest and neuronal differentiation of human neuroblastoma-derived cell lines."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 307. 206-213 (2003)
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[Publications] Ozaki, T., Watanabe, K., et al.: "Function of p73, not of p53, is inhibited by the physical interaction with RACK1 and its inhibitory effect is counteracted by pRB."Oncogene. 22. 3231-8242 (2003)
