2003 Fiscal Year Annual Research Report
H.pylori Cag Aによる細胞内SHP-2活性の異常増加と細胞増殖制御の撹乱
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15590264
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
東 秀明 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助教授 (20311227)
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| Keywords | 癌 / SHP-2 / シグナル伝達 / 感染症 |
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| Research Abstract |
H.pylori病原因子CagAタンパク質は、感染成立後H.pyloriから宿主細胞内に注入されチロシンリン酸化を受ける。申請者はこれまでに、CagAが細胞内SHP-2活性を亢進することで増殖因子刺激様の影響を細胞に与えることを報告した。本研究では、CagAにより修飾されるSHP-2介在性シグナル伝達系の解明を目的とした。
Tet-On systemを用いCagAの発現制御が可能なAGSヒト胃上皮細胞株を樹立した。CagAを誘導発現させた細胞株ではCagAのチロシンリン酸化が確認され、さらに、CagA陽性H.pylori感染時に観察される特徴的な細胞形態変化hummingbird表現型を示した。
CagAの細胞内標的分子であるSHP-2は、Rasの活性化に関わる分子として報告されている。そこでCagA安定発現細胞を用い、hummingbird表現型誘導活性を指標としてCagA生物活性がRas/MAPKシグナル伝達系に及ぼす影響を検討した。その結果hummingbird誘導活性は、優性陰性型Ras分子の異所性発現では全く影響を受けなかった。また、Rasの活性調節因子であるGrb2の優性陰性型分子を発現させた細胞においても同様の結果であった。一方、MAPKK阻害剤処理およびsiRNAを用いてSHP-2の発現を抑制した細胞では、CagA依存的な細胞形態変化が阻害された。以上よりCagAは、SHP-2の活性化とRas活性に非依存的なMAPKカスケードの活性化を通して、細胞形態変化を誘導していることが示唆された。
以上に加え、胃上皮におけるCagAの発癌作用およびその発症機構を解明するため、CagAトランスジェニックマウスを作成中であり、今後胃細胞癌化とH.pylori感染との関係を個体レベルで解析していく予定である。
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[Publications] Takebayashi, T.: "NF-kB-dependent induction of cyclin D1 by pRB family proteins and tumor-derived pRB mutants"J.Biol.Chem.. 278. 14897-14905 (2003)
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[Publications] Tsutsumi, R.: "Attenuation of helicobacter pylori CagA-SHP-2 signaling by interaction between CagA and C-terminal Src kinase"J.Biol.Chem.. 278. 3664-3670 (2003)
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[Publications] Umehara, S.: "Helicobacter pylori CagA protein on the growth and survival of B lymphocytes, the origin of MALT lymphoma"Oncogene. 13. 8337-8342 (2003)
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[Publications] Yamazaki, S.: "The CagA protein of Helicobacter pylori is translocated into epithelial cells and binds to SHP-2 in human gastric mucosa"J.Infect.Dis.. 187. 334-337 (2003)
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[Publications] Azuma, T.: "The effects of cure of Helicobacter pylori infection on the signal transduction of gastric epithelial cells"Aliment.Pharmacol.Ther.. 18. 39-44 (2003)
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[Publications] Zhou, W.: "The diversity of vacA and cagA genes of Helicobacter pylori in East Asia"FEMS Immunol.Med.Microbiol.. 40. 81-87 (2004)
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[Publications] Higashi, H.: "Helicobacter pylori CagA induces Ras-independent morphogenetic response through SHP-2 recruitment and activation"J.Biol.Chem.. (In press).
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[Publications] Azuma, T.: "Association between diversity in the Src homology 2 domain-containing tyrosine phosphatase binding site of Helicobacter pylori CagA protein and gastric atrophy and cancer"J.Infect.Dis.. (In press).
