2003 Fiscal Year Annual Research Report
先天性無痛無汗症におけるチロシンキナーゼ型神経成長因子受容体遺伝子の変異と表現型
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15590292
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
犬童 康弘 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (40244131)
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| Keywords | 先天性無痛無汗症 / 遺伝性感覚自律神経性ニューロパチーIV型 / 神経成長因子 / 神経成長因子受容体 / チロシンキナーゼ型受容体 / TRKA / NTRK1 |
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| Research Abstract |
平成15年度
1)TRKA遺伝子の変異解析:我々が確立したゲノムDNAからTRKA遺伝子のすべてのエキソンを増幅し直接塩基配列を決定する方法(Mardy et al.1999)を用いて日本人CIPA患者家系とさらに海外(クウェート、イタリア、米国、オランダ)から新たに依頼された症例の解析を進めた。
2)TRKA遺伝子のハプロタイプ(アレロタイプ)解析:我々が独自に見いだしたTRKA遺伝子内に位置する8個の多型部位(IVS2+49C/T,IVS2+84G/A,IVS5+100/T,intron10:D1S506,IVS13+118T/C,exon 14:c.1740G/A,IVS14-4A/delA,exon15:c.1953C/T)について解析しハプロタイプを調べた。
3)エキソントラップ法を用いたスプライス変異の証明:TRKA遺伝子のエキソン/イントロン/エキソンを含むDNA断片を、Long PCR法により患者および正常コントロールから増幅し、プラスミドベクター(pBluescript)にサブクローニングし、これらをさらにエキソントラップベクターであるpSPL3(GIBCO BRL)へサブクローニングした。
4)発現実験によるミスセンス変異の確認:正常TRKA cDNA発現プラスミド(pCAGGS)を鋳型に、in vitro突然変異誘発法(GeneEditor in vitro Site-Directed Mutagenesis Systemを利用)によりミスセンス変異を導入した。
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[Publications] E.Toscano: "Reply to a letter to the editor by Klein CJ et al."Annals of Neurology. 53. 418-419 (2003)
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[Publications] 犬童康弘: "先天性無痛無汗症"小児内科 小児疾患診療のための病態生理2. 35巻増刊号. 783-785 (2003)
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[Publications] 犬童康弘: "先天性無痛無汗症と自律神経障害"Clinical Neuroscience. 21. 1437-1438 (2003)
