2004 Fiscal Year Annual Research Report
走化因子ヒトS19リボソーム変異蛋白質によるアポトーシス機構の制御
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15590350
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
西浦 弘志 熊本大学, 大学院・医学薬学研究部, 助手 (90284760)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
棚瀬 純男 熊本大学, 医学部, 教授 (20112401)
渋谷 陽子 熊本大学, 医学部附属病院, 助手 (70094018)
小川 峰太郎 熊本大学, 発生医学センター, 教授 (70194454)
荒木 喜美 熊本大学, 発生医学センター, 助教授 (90211705)
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| Keywords | S19リボソーム蛋白 / マウス胚性幹細胞 / アポトーシス / 補体C5aレセプター / JAK-STAT |
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| Research Abstract |
平成16年度の計画は、ヘモアグルチニンで標識したヒトS19リボソーム蛋白(RP S19) cDNAを組み込んだ過剰発現ベクターpCAGGSを持つマウス胚性幹細胞を樹立し、マウスでのRP S19の動態を検索することが目的であった。
前準備段階として、マウスNIH3T3細胞を用いて、正常RP S19と変異Q137N RP S19を持つ株を樹立した。樹立株を用いて、マンガン誘導性アポトーシスにおけるRP S19とQ137N RP S19の挙動を観察すると、大変興味深い現象を確認した。
1.RP S19が過剰発現する株は、アポトーシスに対する感受性が上昇した。一方、RP S192量体が産生できない変異株は、アポトーシスに対して耐性を獲得した。
2.アポトーシス誘導時の細胞上製よりRP S192量体の存在をウエスタンブロティング法にて確認し、その受容体である補体C5aレセプターの発現も免疫組織学的手法およびFACSにて細胞膜上で観察出来た。
3.上記の現象は、抗体を用いた抑制実験より、RP S192量体の受容体補体C5aレセプターの関与が強く示唆された。
以上の事より、マンガン誘導性のアポトーシスには、RP S192量体刺激による補体C5aレセプター依りの新たなアポトーシスシグナルが関与すると示唆した。
上記の現象におけるアポトーシスシグナルの検索を目的に、RT-PCR法を用いて、JAK-STAT経路のシグナルを解析した。
1.STAT5-Bcl-XL、およびJAK1-STAT1経路の関与が示唆された。
以上の事を踏まえて、計画を継続している。
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