2005 Fiscal Year Annual Research Report
アポリポ蛋白Eを標的としたアミロイドーシス診断法開発の基礎検討
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15590496
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| Research Institution | JICHI MEDICAL SCHOOL |
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Principal Investigator |
山田 俊幸 自治医科大学, 医学部, 助教授 (50211636)
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| Keywords | アミロイドーシス / モノクロナル抗体 / 炎症 / マウスモデル / アポリポ蛋白E / 診断法 / イムノターゲッティング / イメージング |
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| Research Abstract |
本研究では全ての型のアミロイド沈着内に存在するとされるヒトアポリポ蛋白E(アポE)に注目し、これを標的としたアミロイドの局在診断、治療を目指した。一昨年度の研究で、既に作製してあるヒトアポEの断片部位を認識するマウスモノクロナル抗体、YK-2をアイソトープ標識して、アミロイドーシスを惹起したヒトアポEノックインマウスに投与し、抗体がアミロイド組織に到達することを確認した。昨年度は抗体投与によりマウスのアミロイドーシス惹起が抑制されるか調べたが充分な抑制効果は得られなかった。
以上の結果を考察して、研究全体のストラテジーは正しいが、抗体YK-2のアミロイド組織内アポEへの結合力が充分ではないと判断した。そこで本年度は結合力の充分な抗アミロイド抗体を取得することを目的とした。ヒトアポE発現マウスに通常の方法でアミロイドーシスを惹起し、沈着臓器を取り出し、水抽出法でアミロイド線維を調整した。これをBalb/cマウスに免疫し、ヒトアポE、またはヒトアポEが会合したアミロイド組織成分を異物と認識して抗体を誘導することを期待した。ポリクロナル抗体のレベルでは免疫源に反応することを確認しているが、モノクロナル抗体としては取得のための実験中であり、現時点では初期スクリーニングの段階で有望なクローンは得られていない。今後もモノクロナル抗体取得を続け、その結合力の評価には分子間相互作用解析装置(ビアコア)を使用する予定である。
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