2004 Fiscal Year Annual Research Report
環境汚染物質モニタリングへのアプローチ:形質転換酵母遺伝子による標的因子検索
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15590529
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| Research Institution | Shokei Gakuin College |
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Principal Investigator |
山本 玲子 尚絅学院大学, 総合人間科学部健康栄養学科, 教授 (70108504)
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| Keywords | 酵母 / 耐性遺伝子 / 感受性遺伝子 / メチル水銀 / カドミウム / 環境汚染物質 / LグルタミンDフラクト-6-燐酸アミドトランスフェラーゼ / モニタリング |
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| Research Abstract |
【目的】酵母は安全でかつ扱いやすい、目的とする遺伝子を高発現させることが可能、などの特質をもち、生体における遺伝子とその機能との対応づけを最も容易かつ厳密に行える真核生物である。そのため、カドミウム(Cd)やメチル水銀(MHg)などの環境汚染物質の毒性メカニズムを解明するには、酵母を用いた細胞内因子の検索が有効である。今年度はメチル水銀の毒性増強因子として同定されているMsn2の作用機構をさらに検討し、メチル水銀の毒性発現機構・生体の防御機構の解明にアプローチした。【結果・考察】MHgの毒性を増強させる因子として同定されているMsn2(Cys2 His2 Zn finger型転写因子:様々なストレスに応答して核に移行し標的遺伝子のプロモーター上にあるSTRE(stress response element)に結合しその転写を活性化)高発現酵母を作成し、酵母に高いメチル水銀感受性を与える事を確認した。この感受性はGFAT(L-glutamine・D-fructose-6-phosphate amidotransferase:細胞内で合成される全てのアミノ糖の前駆体であるグルコサミン6リン酸の合成を触媒するため、細胞生存に必須の酵素)の発現が抑制されることにより引き起こされる現象と考えられた。そこで、Msn2と結合することが知られているタンパクSOK2の欠損株でメチル水銀感受性を検討し、高感受性を示す事を見出した。この株においてはGFATmRNAレベルの低下が認められた。また、GFATプロモータ/lacZを用いたレポーターアッセイによってもSOK2欠損によるGFATプロモーター活性低下が見られた。しかし、野生株にMsn2を高発現させた場合に比べこれらの低下の度合いは少なかった。また、Msn2を導入し高発現させた株では、SOK2mRNAレベルの有意な低下が認められた。これらの結果から、Msn2が示すメチル水銀毒性増強作用にはSok2が関与しているが、部分的であると考えられた。現在、さらにGFAT遺伝子の転写に関与するSok2以外の蛋白質の検索を行なっている。
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Research Products
(1 results)
