2004 Fiscal Year Annual Research Report
頻脈性不整脈の発生・維持機構を分子生物学的に解明する
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15590753
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
大草 知子 山口大学, 医学部, 助手 (00294629)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
矢野 雅文 山口大学, 医学部附属病院, 講師 (90294628)
松崎 益徳 山口大学, 医学部, 教授 (60116754)
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| Keywords | 頻脈性不整脈 / 心房細動 / ギャップ結合 / コネキシン / 興奮刺激伝播 / レニン・アンジオテンシン系 |
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| Research Abstract |
頻脈性不整脈は日常臨床で最もよく見かける不整脈であり、特に70歳以上の健常者と思われる人の約6〜10%にみられると報告され、近年の高齢化に伴いその罹患率は増加している。頻脈性不整脈の惹起・維持機構には心筋細胞の器質的変化も関与しており、これには細胞間結合構成蛋白や間質組織の変化が含まれる。AFをはじめとする頻脈性不整脈の発生・維持には心筋の機能的・器質的リモデリングが重要な役割を担っていると考えられる。近年、不整脈の発生・維持機構の一つとして細胞内Ca2+ホメオスタシスの異常が考えられているが、その詳細なメカニズムも未だ明らかではない。我々はこれまで種々の病的心筋細胞(心肥大、心筋症、頻脈誘発性心不全等)におけるCa2+制御機構の異常を報告してきた。また、Ca2+制御蛋白質の一つであるIP3受容体は細胞間結合のギャップ結合に存在することも報告し、細胞間結合構成蛋白質の変化も頻脈性不整脈の発生・維持に重要な役割を担っていることが考えられる。平成16年度は、以下の研究を行った。1)培養心筋細胞への高頻度電気刺激負荷によるギャップ結合リモデリングの検討 心筋細胞間の興奮伝播はギャップ結合を介して行われ、その質的・量的変化は回帰性不整脈の一因になると考えられている。新生児ラット培養心筋細胞を用いて、高頻度電気刺激(RES)によるCx43発現量と興奮伝播の変化について検討した。方法と結果:培養心筋細胞に120分間のRESを負荷し、RT-PCRおよびWesternblot法を用いてCx43発現量の変化を経時的に解析した。RESによりCx43蛋白質および遺伝子発現量は60分後には有意に増加した。心筋細胞中のangiotensin II (AngII)は15分後に約2倍に上昇した。MAPK系のERKは2峰性に5分と60分で、またJNKも15分と60分で著明に活性化された。p38MAPKは5分後に1峰性に活性化された。細胞外電位記録法により心筋細胞の興奮伝播特性の変化を解析したところ、RESによりactivation timeは著明に短縮した。これらの変化はlosartanにより抑制された。結語:RESは、早期より心筋細胞内のAngII産生を増加し、MAPK系を活性化することによりCx43発現量を増加させた。その結果、細胞間の刺激伝播異常を引き起こし不整脈基質の一つとなる可能性が示された。2)アルドステロンの心筋細胞ギャップ結合におよぼす影響の検討 ラット新生仔培養心筋細胞を用いて、Aldの心筋細胞自己拍動数およびCX43発現量におよぼす影響を、種々の濃度のAldを用いて経時的に検討した。Cx43蛋白量変化はwestern blot法にて測定した。10^<-4>M Ald添加では、3時間後より経時的にCx43発現量が著明に減少した。10^<-6>M Aldは添加後24時間に有意に減少した。一方、10^<-8>M Ald添加ではCx43発現量は24時間に約1.4倍増加した。高濃度Aldは自己拍動数を約40%減少させたが、低濃度Ald添加では約40%増加した。Aldは濃度依存性に心筋細胞のCx43の発現量に影響をおよぼし、電気生理学的特性を変化させる。RAASを調節することは不整脈の新しい治療法となる可能性が考えられた。
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Research Products
(1 results)
