2004 Fiscal Year Annual Research Report
顔面肩甲上腕型筋ジストロフィーの臨床分子遺伝学的研究
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15590922
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| Research Institution | National Institute of Neuroscience, National Center of Neurology and Psychiatry |
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Principal Investigator |
林 由起子 国立精神・神経センター, 疾病研究第一部, 室長 (50238135)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西野 一三 国立精神・神経センター, 疾病研究第一部, 部長 (00332388)
金子 加奈子 (後藤 加奈子) 国立精神・神経センター, 疾病研究第一部, 研究員 (00392415)
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| Keywords | 筋ジストロフィー / 常染色体優性 / 遺伝子欠失 / 染色体4q35 / 遺伝子診断 / サザンブロット解析 / PCR法 / 臨床的多様性 |
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| Research Abstract |
FSHDは常染色体優性の遺伝形式をとる頻度の高い筋疾患である。染色体4q35に存在する3.3-kb繰り返し配列(D4Z4)の欠失によることが明らかとなっているが、遺伝子欠失領域から責任遺伝子は単離されておらず、遺伝子診断は現在サザンブロット解析によっている。我々は、本邦におけるFSHD家系についてのサザンブロット解析のほとんどを担っているが、診断施設が一極化している要因として、その方法の複雑さ、困難さが挙げられる。すなわち、FSHD遺伝子領域は10〜300kbと多様であること、GC含有量の多い繰り返し配列を有していること、他の染色体領域に似た配列が存在することなどによる。
我々は、この煩雑な診断法に代わるより簡便で、しかも短時間で行える方法を開発した。この簡易遺伝子診断法は、PCR法を用いて実際のD4Z4リピート数を数えるもので、サザンブロット解析に比べ、少量のDNAで短時間に簡便に診断の行える有用なものである。本方法を用いてFSHD75例について解析したところ、サザンブロット解析結果に合致するバンドを95%でみいだすことができた。サザンブロット解析の診断率は98%であると言われていることから、本方法がきわめて有用であることが明らかとなった(特許出願中、paper in preparation)。
また、FSHDにおける臨床的多様性の発生機序、ならびに染色体位置効果の有無を明らかにするために、D4Z4内に存在するdouble homeobox domainを有する遺伝子(DUX4)、欠失領域近傍にあるFSHD region gene(FRG)2、FRG1、adenine nucleotide translocator-1といった遺伝子の発現について定量的RT-PCRを用いて検討したが、患者筋とコントロール筋で差のないことを明らかにした。
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