2003 Fiscal Year Annual Research Report

消化器癌に対する鏡視下手術の妥当性に関する分子遺伝学的検討

Research Project

Project/Area Number	15591411
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	白石猛九州大学, 医学部附属病院, 助手 (30315139)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	宇都宮徹九州大学, 医学部附属病院, 講師 (30304801) 田中文明九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (30332836) 吉武慎一郎九州大学, 医学部附属病院, 助手 (80315142) 森正樹九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (70190999)
Keywords	鏡視下手術 / colon26細胞 / DNAマイクロアレイ法 / Real time PCR / Pik3ca / Pk3r1 / TIMP3
Research Abstract	【目的】鏡視下と開腹手術の術後各臓器での遺伝子発現プロファイルの相違を経時的に比較検討し、鏡視下手術で腫瘍増殖が緩徐である機序の解明を行う。【方法】マウス皮下にcolon26細胞を移植し、開腹、気腹群で術後腫瘍を計測マイクロアレイ法により各臓器(脾、肝、肺)と腫瘍の遺伝子発現を検討 Real time PCRによる確認。マウス血清および腫瘍においてpick upした遺伝子の蛋白レベルでの変化をWestern blotで確認した。【結果】開腹、気腹、麻酔のみ群で術後皮下腫瘍を観察し、開腹群で有意に腫瘍の増大を認め、特に術後2日目までの間が有意に腫瘍の増大率が大きい事が分かった(p=0.021) 原因を明らかにするため、マイクロアレイ法を用いた肝臓、脾臓、肺および腫瘍での遺伝子発現プロファイルの検討では、開腹群で特異的に低発現する遺伝子としてTIMP3、高発現する遺伝子の一つとしてPI3 kinase p110α catalytic subunit (Rik3ca)とPI3 kinase p85α regulatory subunit (Pik3r1)が同定された。発現変化はreal time PCRでも確認できた。アジレントのマイクロアレーの結果に対して16遺伝子をピックアップし3臓器+腫瘍において7 time point + normalの検体のReal time PCRを行った。(臓器によってその発現パターンがマイクロアレーの結果と一致するものとそうで無いものがあり、cDNA作成時の逆転写酵素の違いや、Real time PCRの検出限界、内部コントロールの考慮なども必要だと考えられた。) TIMP3は、MMP-1,2,3,7,9,13,14,15を非可逆的にinactivateする。OverexpressionによってFas-associated death domain-dependent mechanismでのアポトーシスを来す(JBC2002)。肝臓、腫瘍、また分泌蛋白であるため血清のWestern blotで術後1日目にLASおよびOPENの群で蛋白の発現が低下し、術後7日目までその影響が持続する事がわかった。【考察】Pik3caおよびPik3r1は癌での発現亢進が報告されており、Pik3caはPTENの存在に関わらずp53によってその発現が抑制される事が報告されている(Genes Dev 2002)。また、PI3 kinaseの活性化はSkp2の発現を亢進させるという報告がある。Skp2の発現をReal time PCRで確認したところ、術後LASとOPENの群で腫瘍部での発現が亢進しており、p27の蛋白発現はLASとOPENの群で低下していた。PI3 kinase subunit mRNAの発現の上昇は肺や肝臓でも認められるにも関わらず、Skp2発現の上昇は腫瘍部のみで認められた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Masuda TA, Inoue H, et al.: "Cyclin-dependent kinase 1 gene expression is associated with poor prognosis in gastric carcinoma."Clin Cancer Res. 15. 5693-5698 (2003)
[Publications] Matsuyama A, Shiraishi T, et al.: "Fragile site orthologs FHIT/FRA3B and Fhit/Fra14A2:Evolutionarily conserved but highly recombinogenic"Proc Natl Acad Sci USA. 100. 14988-14993 (2003)
[Publications] Yamashita K, Mimori K, et al.: "A tumor-suppressive role for trypsin in human cancer progression."Cancer Res. 63. 6575-6578 (2003)
[Publications] Yamashita K, Sunil, et al.: "MAL gene expression in esophageal cancer suppresses motility, invasion and tumorigenicity and enhances apoptosis through the Fas pathway"Oncogene. 22. 3463-3471 (2003)
[Publications] Mimori K, Inoue H, et al.: "INI-1, a partner gene of ALL-1, is highly conserved in human acute leukemia"Oncology Rep. 10. 551-553 (2003)
[Publications] 黒木保, 井上裕, 森正樹: "消化器外科レビュー:発癌機構(分担執筆)"総合医学社. 268 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

消化器癌に対する鏡視下手術の妥当性に関する分子遺伝学的検討

Principal Investigator

白石 猛 九州大学, 医学部附属病院, 助手 (30315139)

Research Products

[Publications] Masuda TA, Inoue H, et al.: "Cyclin-dependent kinase 1 gene expression is associated with poor prognosis in gastric carcinoma."Clin Cancer Res. 15. 5693-5698 (2003)

[Publications] Matsuyama A, Shiraishi T, et al.: "Fragile site orthologs FHIT/FRA3B and Fhit/Fra14A2:Evolutionarily conserved but highly recombinogenic"Proc Natl Acad Sci USA. 100. 14988-14993 (2003)

[Publications] Yamashita K, Mimori K, et al.: "A tumor-suppressive role for trypsin in human cancer progression."Cancer Res. 63. 6575-6578 (2003)

[Publications] Yamashita K, Sunil, et al.: "MAL gene expression in esophageal cancer suppresses motility, invasion and tumorigenicity and enhances apoptosis through the Fas pathway"Oncogene. 22. 3463-3471 (2003)

[Publications] Mimori K, Inoue H, et al.: "INI-1, a partner gene of ALL-1, is highly conserved in human acute leukemia"Oncology Rep. 10. 551-553 (2003)

[Publications] 黒木 保, 井上 裕, 森 正樹: "消化器外科 レビュー:発癌機構(分担執筆)"総合医学社. 268 (2003)

白石猛九州大学, 医学部附属病院, 助手 (30315139)

[Publications] 黒木保, 井上裕, 森正樹: "消化器外科レビュー:発癌機構(分担執筆)"総合医学社. 268 (2003)