2004 Fiscal Year Annual Research Report
大腸癌におけるサバイビンの機能解析と遺伝子治療への展開
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15591454
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
山本 哲久 大阪医科大学, 医学部, 助手 (50330072)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷川 充彦 大阪医科大学, 医学部, 教授 (00111956)
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| Keywords | サバイビン / 遺伝子治療 / バリアント / プロモーター |
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| Research Abstract |
細胞株ならびに大腸癌切除標本から採取された試料から、DNA、RNAを抽出した。RNAを元にcDNAを作成し、定量的RT-PCRを行い、サバイビンおよびバリアントの発現量を解析した。また、HARD法により手術標本から得られた組織を用いて制癌剤感受性試験を行い、各種制癌剤に対する感受性を求めた。次に、PCR解析結果と資料提供者の診療情報より得られた臨床的悪性度および病理所見との関係、制癌剤感受性試験の結果とを統計学的に解析を行った。その結果、以下のような結果が導かれた。
1)サバイビン遺伝子は、全ての悪性細胞株および癌部においては非癌部に比べて著明に高発現を認めた。しかしながら、非癌部においては約4割がその発現を認めず、また発現していたとしても極低発現であった。
2)バリアントについても、上記と同様な結果が導き出された。特に、癌の臨床病期分類と相関を呈し、悪性度が高くなるほど、2Bの割合は低発現を示し、ΔEx3の割合は高発現を示した。また、2Bの割合は生存予後と有意な相関を示し、低発現ほど予後不良であった。
3)制癌剤との関連では、サバイビンの発現が高いほど制癌剤感受性が高く見られた。特に、CPT-11、5FUについては、有意義を認めた。
4)病理標本を作成し、免疫組織化学的染色法によりアポトーシス細胞、Ki-67 labeling indexの検出をおこなったが、mRNAレベルではサバイビンとバリアントにおいて有意さの検出にはいたらなかった。
以上の結果より、サバイビンとそのバリアントについては、癌の進行度や予後と有意な相関関係を示し、新たな癌の診断や分子病理学的なマーカーとしての有用性が示唆された。また、腫瘍特異的な発現を示すことから、治療標的分子として捉えることができ、新たな薬剤の開発につながるものと考えられた。なお、今回の検討では、DNAを用いたサバイビンプロモーター領域のメチル化については、十分な解析データを得ることができず、今後も引き続き検討を行っていきたいと思われる。
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