2004 Fiscal Year Annual Research Report
肺移植におけるV型コラーゲンによる経口寛容の誘導と機構解析
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15591466
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
関根 康雄 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助手 (70312957)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安福 和弘 千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (60372356)
吉田 成利 千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (90334200)
藤澤 武彦 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (80110328)
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| Keywords | 肺移殖 / 経口寛容 / V型コラーゲン / 拒絶反応 |
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| Research Abstract |
V型コラーゲン経口寛容の機序における調節性T細胞の役割
方法:F344からWKYへのラット同種肺移植モデルを使用した。経口寛容の誘導にはレシピエントであるWKYに術前col(V)を隔日で1回10μg、計8回経口投与後、F344の同種左肺移植を行い、tolerant ratを得た。このtolerant ratを犠牲死させ、その脾臓よりmagnetic micro-beadsを使用してCD4+及びCD8+T細胞を分離。次に1×10^7個の細胞を各々normal WKYに静注しadoptive transferを行い、その後F344から同種肺移植を行った。以上により得られた2群:CD4+T細胞adoptive transfer群及びCD8+T細胞群において、Rejection pathology、各種抗原に対する遅延型過敏反応即ちDTH反応、Cytokine、及びMixed lymphocyte reactionを検討した。
結果:無治療untreated allograftにおいてはドナーアロ抗原、即ちF344脾細胞を耳たぶに皮下注射すると強いDTH反応を認めたが、Tolerant CD4+T細胞注入群ではアロ抗原に対するDTH反応が有意に抑制されていた。一方CD8+T細胞群では強いDTH反応を示した。また、術後2週間におけるRejection pathologyの比較ではCD4+T細胞群では移植急性拒絶反応が抑制されていた。ELISA法を利用して対象群血清中のTGF-betaを測定した結果、CD8+T細胞群では正常WKYと比較して軽度上昇していたが、CD4+T細胞群においては他の2群と比べて有意に高い値を示した。抗TGF-beta抗体のドナー抗原に対するDTH反応に与える影響についての検討では、Tolerant CD4+T細胞のadoptive transferによりDTH反応が抑制されたが、ドナー抗原と抗TGF-beta抗体を混ぜた場合、再び強いDTH反応を認めた。MLR培養液中のTGF-betaの検討ではtolerant allograftのCD4+T細胞ではTGF-betaが産生されていることが証明された。
考察:ラット肺移植モデルにおいてV型コラーゲンよる経口寛容によりCD4+調節性T細胞が誘導され、CD4+T細胞が産生するTGF-betaがV型コラーゲン経口寛容による急性拒絶反応の抑制の機序に関与していると考えられた。
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