臍帯血由来未分化間葉系細胞による骨軟骨欠損の修復法の開発

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591599
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 占部 憲 北里大学, 医学部, 助教授 (90284489)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 成瀬 康治 北里大学, 医学部, 助手 (60276087)
• Keywords: 臍帯血 / 軟骨細胞 / 再生 / 骨芽細胞 / 細胞分化

Research Abstract

1.ラット胎児血より未分化間葉系細胞を単離する方法を確立した。この未分化間葉系細胞は、特殊な分化因子や培養環境を用いることなく骨芽細胞様細胞と軟骨細胞様細胞に分化することを確認した。また胎児血の至適な採取時期を決定した。
2.type II procollagen遺伝子発現には、成熟軟骨細が発現するtype IIBと軟骨に分化する以前の細胞が発現するtype IIAが存在する。胎児血由来未分化間葉系細胞より分化した軟骨細胞様細胞は、肋軟骨より単離した成熟軟骨細胞と比較しtype IIAの発現が増強しており、より未分化な細胞と考えられた。
3.ラット胎児血由来未分化間葉系細胞は、培養を継続することでCOL2A1,COL10A1,COL11A2の遺伝子発現が増強し、type IIAの遺伝子発現が減少していた。継続培養によって比較的未分化な軟骨細胞様細胞がより成熟したものと考えられた。
4.ラット胎児血由来未分化間葉系細胞を継代培養し、細胞の自動分化能を評価した。骨軟骨細胞への自動分化能が低下することが示された。
5.ラット胎児血由来未分化間葉系細胞の凍結保存を行った。通常の細胞保存液に細胞を混濁し保存した後解凍して培養したところ、特殊な分化因子や培養環境を用いることなく骨芽細胞様細胞と軟骨細胞様細胞に分化することを確認した。凍結保存を行っても、その自動分化能は維持されることが示された。

Research Products

• [Publications] Ken Urabe: "Determination of the completer cDNA sequence of rat type II collagen and evaluation of distinct expression patterns of type IIA and type IIB procollagen mRNAs during fracture repair in rats."J Orthop Sci. 8. 585-590 (2003)
• [Publications] 占部憲: "骨・関節軟骨の保存"Organ Biology. 10・4. 35-41 (2003)