2003 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
15591702
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Research Institution | Yokohama City University |
Principal Investigator |
小川 毅彦 横浜市立大学, 医学部, 講師 (50254222)
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Keywords | 精子形成 / 幹細胞 / 細胞培養 |
Research Abstract |
精原幹細胞の培養実験 マウス新生児の精巣細胞をFeeder cell(MEF)の上で、4種類の成長因子(EGF, FGF, LIF, GDNF)とともに培養することで、生殖幹細胞(GS細胞)が樹立されたとの報告が2003年4月に発表された。この発表の追試に取り掛かり、さらに培養条件の検討を行った。その結果、feeder細胞はMEF以外でも培養可能であること、成長因子としてはGDNFが最も有効であることなどを確認した。GS細胞はdoubling timeは3〜4日であり、これまで、20継代以上でもその増殖能は変わらない。また、マウス精巣に移植すると精子形成を生じ、雌マウスとの自然交配で産児を得ることも確認された。 精原細胞移植により不妊宿主マウスを妊孕化する実験 精原細胞移植後に宿主マウスを効率良く妊孕化するために、幼若マウス(10〜15日齢)の精巣に放射線照射し、精原細胞移植を行った。放射線照射は内在性生殖細胞を除去する目的で行うが、その線量の調節は12Gy前後が適当であると結論した。放射線照射の1〜3日後に精原細胞移植を行い、2ヵ月後より雌マウスと交配実験をおこなった。これまでのところ、妊孕能を獲得したマウスでは高率(50%以上)にドナー細胞由来の産仔が得られることが確認された。
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