腎細胞癌に対する非破壊的幹細胞移植モデルマウスの作製とその応用

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591711
• Research Institution: Iwate Medical University
• Principal Investigator: 藤岡 知昭 岩手医科大学, 医学部, 教授 (80173409)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石田 陽治 岩手医大学, 医学部, 助教授 (70151389)
• Keywords: ミニ移植 / 腎癌 / 免疫療法 / 腫瘍ワクチン / 腫瘍特異ペプチド

Research Abstract

1.腎細胞癌のミニ移植モデルマウスを作製する。
(1)ヒト腎細胞癌の細胞株のスクリーニング施行した。
癌抗原としてMUC1を用いる。MUC1由来のペプチドはHL4-A2上に発現することが判明しているので、HLAのA locusがA2を示し、かつMUC1を発現しているヒト腎細胞癌の細胞株をスクリーニングした。
(a)HLA-A2の発現
細胞株ACHN、.細胞株Caki-1、Caki-2はHLA-A2を示さなかったが、細胞株A-498はHLA-A2を示した。
(b)MUC1の発現
細胞株ACHN、細胞株Caki-1、Caki-2、細胞株A-498はいずれもMUC1を発現していた。
以上の結果から、マウスに移植するヒト細胞株はA-498を選択した。陰性コントロールとして、細胞株ACHN、細胞株Caki-1、Caki-2を使用することにした。
(2)ヒト腎細胞癌A-498をSCIDマウスに移植をした。
SCIDマウスの皮下にA-498の細胞株(1x10^4、1x10^5、1x10^6)を移植した。いずれの群も生着したものの、1x105個以上の細胞数であれば、皮下に腫瘤を形成した。まだ、1x10^6以上の細胞数を移植した場合のみ1ヶ月前後から死亡していくことが明らかとなった。
平成16年度
(3)Cytotoxic T細胞(CTL)の誘導し、A-498移植マウスに投与。生存率をCTL非投与群と比較する。HLA-A2をもったヒトから末梢血を採取後、Dendritic cell(DC)を誘導し、ペプチドをパルスする。これらの細胞培養中にautologous末梢血単核球をともに培養し、CTLを誘導する。

Research Products

• [Publications] Okada K, Katagiri T, Tsunoda T, Mizutani Y, Suzuki Y, Kamada M, Shuin T, Miki T, Nakamura Y.: "Analysis of gene-expression profiles in testicular seminomas using a genome-wide cDNA microarray."International Journal of Oncology. 23. 1615-1635 (2003)
• [Publications] Tanaka N, Babazono T, Saito S, Sekine A, Tsunoda T, Haneda Y, Fujioka T, Kaku K, Kawamori R, Kikkawa R, Iwamoto Y, Nakamura Y, Maeda S.: "Association of solute carrier family 12 (sodium/chloride) member 3 with diabetic nephropathy, identified by genome-wide analysis of single nucleotide polymorphism."Diabetes. 52(11). 2848-2853 (2003)
• [Publications] Yashima A, Maesawa C, Uchiyama M, Tarusawa M, Satoh T, Satoh M, Enomoto S, Sugawara K, Numaoka H, Murai K, Utsugisawa T, Ishida Y, Masuda T.: "Quantitative assessment of contaminating tumor cells in autologous peripheral blood stem cells of B-cell non-Hodgkin lymphomas using immunoglobulin heavy chain gene allele-specific oligonucleotide real-time quantitative-polymerase chain reaction."Leuk Res.. 27. 925-934 (2003)
• [Publications] Tasaki Tetunori, Satoh Shyukuko, Gotoh Kenji, Fujii Keiko, Sasaki Sakiko, Takadate Junko, Tachibana Mihoko, Ono Yoko, Ishida Yoji.: "Transfusion-related problems following major ABO-incompatible bone marrow transplantation"Transfusion and Apheresis Science. 28. 155-161 (2003)
• [Publications] Uchiyama M, Maesawa C, Yashima A, Tarusawa M, Satoh S, Ishida Y, Ito S, Murai K, Enomoto S, Utsugisawa T, Motoyoshi K, Masuda T.: "Development of consensus fluorogenically labeled probes of the immunoglobulin heavy-chain gene for detecting minimal residual disease in B-cell non-Hodgkin lymphomas"Cancer Sci.. 92. 877-885 (2003)
• [Publications] Hattori Y, Yamashiro Y, Okayama N, Tanaka K, Yamauchi H, Ishida Y, Kuriya S.: "Characteristics of Japanese Thalassemia"Int.J.Human Genet.. 3(4). 259-267 (2003)