ヒト生殖領域におけるケモカイン・ケモカイン受容体システムの機能解析とその臨床応用

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591746
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 下屋 浩一郎 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (40291950)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 古山 将康 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (00183351) ; 木村 正 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (90240845) ; 早田 憲司 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80314433) ; 村田 雄二 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (40283759) ; 神崎 徹 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (00263278)
• Keywords: ケモカイン / 卵管 / 精子 / Fractalkine / CX3CR1 / Erythropoietin / 子宮内膜症 / 腹水

Research Abstract

ヒト生殖領域におけるケモカイン・ケモカイン受容体システムの機能解析を行う目的でケモカインの一つであるFractalkine (FRK)に注目し、その機能解析を行った。まず卵管組織におけるFRK-FRK受容体(CX3CR1)系について解析し、卵管組織におけるFRK蛋白およびmRNAの発現をWestern blot、免疫組織学的解析、RT-PCRにて示し、卵管上皮細胞がFRKの産生源であった。さらに卵管組織におけるFRK受容体陽性細胞の存在を免疫組織学的解析およびRT-PCRにて明らかとした。また精子にFRK受容体mRNAが存在することをRT-PCRにて示し、さらにその局在が精子の尾部であることを免疫組織学的検討によって明らかとした。これらの知見はHuman Reproduction (vol.19,No.2,409-414,2004)にて報告した。更に子宮内膜、脱落膜におけるFRK-FRK受容体(CX3CR1)系の解析を行い、子宮内膜および脱落膜においてもFRK-FRK受容体(CX3CR1)系が機能していることを報告し、性周期などの影響について現在解析中である。また腹腔内におけるFRK-FRK受容体(CX3CR1)系の解析を行うためにまず腹水中のFRK濃度をWestern blot解析およびELISAを用いて測定し、子宮内膜症との関連を見出し、詳細な検討を進行中である。また精子機能におけるケモカイン-リンパ球系細胞の関与を解析するために酸化ストレスの指標としてErythropoietin(EPO)に注目し、精漿中のEPO蛋白の存在をWestern blot解析にて示し、ELISAにてEPO濃度を測定し、精液所見との関連を解析した。その結果、精漿中には恒常的にEPO蛋白が存在することが明らかとなり、これらの知見をFertility Sterility (in press 2004)に報告した。

Research Products

• [Publications] Shiki, Y., Shimoya, K, Tokugawa, Y, Kimura, T., Koyama, M., Azuma, C., Murata, Y., Eguchi, N., Oda, H., Urade, Y.: "Changes of lipocalin-type prostaglandin D synthase level during pregnancy"J Obstet Gynecol Res. 30. 65-70 (2004)
• [Publications] Zhang, Q., Shimoya, K., Temma, K., Kimura, T., Tsujie, T., Shioji, M., Wasada, K., Fukui, O., Hayashi, S., Kanagawa, T., Kanzaki, T., Koyama, M., Murata, Y.: "Expression of fractalkine in the Fallopian tube and CX_3CR1 in sperm"Hum Reprod. 19. 409-414 (2004)
• [Publications] Shimoya, K, Zhang, Q., Temma, K., Tomiie, M., Wasada, K., Kimura, T., Kanzaki, T., Koyama, M., Murata, Y.: "Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) levels in cervicovaginal secretion of elderly women with or without indefinite complaint"Maturitus. (In press). (2004)
• [Publications] Tenma, K., Shimoya, K., Zhang, Q., Kimura, T., Wasada, K., Kanzaki, T., Azuma, C., Koyama, M., Murata, Y.: "Effects of 4-hydroxy-2-nonenal (HNE), a marker of oxidative stress, on the uterine contraction"Mol Hum Reprod. (In press). (2004)
• [Publications] Tenma, K., Shimoya, K., Hashimoto, K., Zhang, Q., Koyama, M., Murata, Y.: "Detection of erythropoietin (EPO) in human seminal plasma"Fertil Steril. (In press). (2004)