2004 Fiscal Year Annual Research Report
胎盤トロフォブラスト合胞体化の分子生物学的機序の解析:妊娠中毒症発症病態の解明
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15591752
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
工藤 美樹 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (80241082)
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| Keywords | 胎盤 / トロフォブラスト / 合胞体化 / 細胞融合 / アミノ酸輸送 / 妊娠中毒症 |
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| Research Abstract |
ヒト胎盤におけるシンシチオトロフォブラストの形成過程が膜表面タンパクであるCD98により制御されているかどうかをトロフォブラストのシンシチウム化のモデルであるBeWo細胞(forskolin添加により細胞内cyclicAMPレベルを上昇させるとシンシチウム化が誘導される)とRNA interference法を用いて検討した。その結果、1)forskolinによって誘導されるBeWo細胞のシンシチウム化に伴ってCD98の発現はmRNAレベル(RT-PCR法により解析)、タンパクレベル(ウエスタンブロット法により解析)共に経時的に上昇していた。2)BeWo細胞をCD98に対するsmall interfering RNAで処理するとforskolinに対する反応が変化し、CD98蛋白の発現量は1/2に低下した。それに伴って、BeWo細胞のシンシチウム化(研究者らが開発したフローサイトメーターを用いたシンシチウム化の定量的測定系を用いて測定)は抑制され、シンシチウム化の古典的マーカーであるhuman chorionic gonadotropinの分泌(EIA法)も低下した。3)scrambled small interfering RNAを用いた実験では、CD98蛋白の発現量、シンシチウム化の程度およびhuman chorionic gonadotropinの分泌には変化が認められなかった。これらの結果は、平成15年度にアンチセンス法を用いて行った実験の結果と一致した。すなわちCD98がシンシチオトロフォブラストの形成過程に関与していることが二つの別々の実験系で証明された。
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