2003 Fiscal Year Annual Research Report
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15657010
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| Research Institution | Yokohama National University |
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Principal Investigator |
笹本 浜子 横浜国立大学, 独立研究・環境情報研究院, 教授 (60334629)
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| Keywords | マングローブ / プロトプラスト培養 / 細胞融合 / 細胞培養 / 組織培養 / 対塩性 / 極限環境 |
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| Research Abstract |
培養細胞、プロトプラストからの個体再生が困難であった、熱帯・亜熱帯の海岸域に生育する、マングローブ各種の培養系を開発し、細脚融合による育種を可能にするため、1)沖縄西表島において採集した、ヒルギダマシ、マヤプシキ、ヤエヤマヒルギなどの無菌の材料を得るための準備として種子の室内育成を行った。2)色々な生育ステージの子葉、葉、芽、花器官等から、カルス誘導のための植物ホルモン等の組み合わせの、種類、濃度の最適条件を明らかにするため、少量液体培地を入れた、多穴シャーレあるいは、透明なカバーを用いた平底サンプル管法(申請者が工夫)を用い、無菌培養したまま、倒立顕微鏡観察する方法により、多数の培地条件の検索を行い、植物ホルモン、培地塩類によって若干の促進効果を得た。進捗部分を報告にまとめた。初めてマヤプシキ子葉からの増殖細胞が継代培養可能になった。3)24穴、96穴などの多穴シャーレを用いて各種細胞壁分解酵素の組み合わせおよび、浸透圧条件の最適条件を検討した。購入したウェルスキャナーを付属させた簡易倒立顕微鏡により、たくさんの条件の効率的観察および、データ処理を行うことにより、数種のマングローブ葉プロトプラストが単離可能になった。この結果は学会発表を行い、論文投稿中である。4)さらに、プロトプラストの簡単な精製法を検討し、いくつかの種について、無菌液体培養を試みた。結果の写真画像処理解析のコンピューターによる効率化を試みた。5)外国産ロッカクヒルギの培養細胞のプロトプラスト培養に対する、4種の塩とpHの影響を調べ、耐塩性の弱いポプラや、草本タバコのプロトプラストと比較し、ナトリウムに対する若干の耐性のほかに、マグネシウムやカルシウム塩による増殖促進効果の特徴を初めて明らかにし、論文準備中である。
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[Publications] H.Sasamoto, S.Ogita, N.Hayashi, Y.Wakita, S.Yokota, N.Yoshizawa: "Development of novel elongated fiber-structure in protoplast cultures of Betula platyphylla and Larix leptolepis."In Vitro Cell.Dev.Biol.Plant. 39. 223-228 (2003)
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[Publications] H.ASHIHARA, S.WAKAHARA, M.SUZUKI, A.KATO, H.SASAMOTO, S.BABA: "Comparison of adenosine metabolism in leaves of several mangrove plants and a poplar species."Plant Physiology and Biochemistry. 41. 133-139 (2003)
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[Publications] 笹本浜子: "マングローブ樹木プロトプラストの高浸透圧耐性と無菌培養"日本植物細胞分子生物学会大会講演要旨集. 21. 145 (2003)
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[Publications] 川名祥史: "西表・ベトナム産マングローブのプロトプラスト単離と培養"日本マングローブ学会'03年次大会講演要旨集. 2 (2003)
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[Publications] 笹本浜子: "カラマツプロトプラストからのカロース繊維形成"日本生物工学会大会講演要旨集. 182 (2003)
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[Publications] 笹本浜子: "マングローブ樹木プロトプラストの内生ホルモン量の影響"日本植物学会大会研究記録. 67. 226 (2003)
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[Publications] 横浜国立大学環境遺伝子工学セミナー: "遺伝子組み換え植物の光と影II"学会出版センター. 253 (2003)
