アンドロゲン依存性コレステロール合成系酵素DHCR24の前立腺癌における機能解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15659379
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 伊藤 哲之 京都大学, 医学研究科, 助手 (70343225)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 賀本 敏行 京都大学, 医学研究科, 助教授 (00281098) ; 羽渕 友則 秋田大学, 医学研究科, 教授 (00293861) ; 小川 修 京都大学, 医学研究科, 教授 (90260611) ; 清川 岳彦 京都大学, 医学研究科, 助手 (40343230) ; 木下 秀文 京都大学, 医学研究科, 講師 (30324635)
• Keywords: 前立腺癌 / コレステロール / Seladin1 / DHCR24 / 酸化ストレス / アポトーシス / アンドロゲン

Research Abstract

前立腺癌細胞株LNCaPを用いた網羅的遺伝子解析によりコレステロール生合成系酵素の一つであるSeladil/24-dehydrocholesterol reductase(DHCR24)がアンドロゲン下流遺伝子であるというマイクロアレイの実験結果得、それをNorthern blotting, quantitative RT-PCRで確認した。蛋白レベルの発現に関してもSeladin1/DHCR24に対するポリクローナル抗体を作製、アンドロゲンにてseladin-1/DHCR24が誘導されることを確認した。pEGFR-N1 vectorにSeladin1/DHCR24遺伝子を組み込み、LNCaP-DHCR24 stable cell(高発現細胞株)を樹立し、Seladin1/DHCR24が小胞体に存在することを確認した。またSeladih/DHCR24は、酸化ストレスによるアポトーシスとの関与も示唆されていることから、この細胞株を用いて過酸化水素添加による酸化ストレス実験を行っているが、現在のところ親株に比べて酸化ストレスに抵抗性を示すことを積極的に示唆する所見は得られていない。