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2017 Fiscal Year Annual Research Report

Identification and characterization of interactions between genomic regions using the locus-specific chromatin immunoprecipitation technology

Research Project

Project/Area Number 15H04329
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

藤井 穂高  大阪大学, 微生物病研究所, 招へい教授 (30302665)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 藤田 敏次  大阪大学, 微生物病研究所, 招へい准教授 (10550030)
Project Period (FY) 2015-04-01 – 2018-03-31
Keywordsクロマチン / エピジェネティクス / ゲノム領域間相互作用 / ゲノム生化学 / 次世代シークエンス法
Outline of Annual Research Achievements

1. βグロビン遺伝子座5'HS5領域と相互作用するゲノム領域の同定とその意義の解析
βグロビン遺伝子座5’HS5領域と相互作用するゲノム領域の網羅的同定に成功し、その成果をGenes to Cells誌に発表した。特に、相互作用しているゲノム領域近傍の遺伝子発現が、NaB処理により亢進することを見出した。加えて、こうした現象の分子機構の解析を行った。
2. インターフェロン誘導性遺伝子群の核内における動的制御機構の解析
3xFLAGタグを付与したS. aureus由来のdCas9 (Sa-dCas9-3xFLAG) の発現プラスミドを作製し、Sa-dCas9-3xFLAGを利用したenChIPの効率が、Sp-dCas9と同等であることを示した。また、AMタグを付与したSp-dCas9を発現するレンチウイルスプラスミドを作製し、これらの系を用いて高い収率でenChIP解析が可能であることを示した。この成果をBMC Research Notes誌に発表した。
3. 関連研究
上記の研究成果を一部利用して (i) ニワトリのB細胞株におけるPax5遺伝子発現調節機構の解析を行い、Pax5遺伝子が存在している染色体とは別の染色体にあるエンハンサーを同定した。その成果をDNA Research誌に発表した。(ii) 3xFLAG-dCas9を発現するトランスジェニックマウス系統を作製し、マウス初代細胞におけるenChIP法実施を可能にした。その成果をGenes to Cells誌に発表した。(iii) スウェーデンのグループと共同で、酸素濃度によるEPAS1遺伝子の発現制御機構の解析を行い、その成果をBiochemical and Biophysical Research Communications誌に発表した。

Research Progress Status

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

29年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (11 results)

All 2018 2017 Other

All Int'l Joint Research (3 results) Journal Article (5 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 4 results) Presentation (1 results) (of which Invited: 1 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

  • [Int'l Joint Research] Shaare Zedek Medical Center(イスラエル)

    • Country Name
      ISRAEL
    • Counterpart Institution
      Shaare Zedek Medical Center
  • [Int'l Joint Research] Postech(韓国)

    • Country Name
      KOREA (REP. OF KOREA)
    • Counterpart Institution
      Postech
  • [Int'l Joint Research] Lund University(スウェーデン)

    • Country Name
      SWEDEN
    • Counterpart Institution
      Lund University
  • [Journal Article] Transgenic mouse lines expressing the 3xFLAG-dCas9 protein for enChIP analysis2018

    • Author(s)
      Fujita Toshitsugu、Kitaura Fusako、Oji Asami、Tanigawa Naoki、Yuno Miyuki、Ikawa Masahito、Taniuchi Ichiro、Fujii Hodaka
    • Journal Title

      Genes to Cells

      Volume: 23 Pages: 318~325

    • DOI

      10.1111/gtc.12573

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] enChIP systems using different CRISPR orthologues and epitope tags2018

    • Author(s)
      Fujita Toshitsugu、Yuno Miyuki、Fujii Hodaka
    • Journal Title

      BMC Research Notes

      Volume: 11 Pages: 154

    • DOI

      10.1186/s13104-018-3262-4

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Promoter-associated proteins of EPAS1 identified by enChIP-MS ? A putative role of HDX as a negative regulator2018

    • Author(s)
      Hamidian Arash、Vaapil Marica、von Stedingk Kristoffer、Fujita Toshitsugu、Persson Camilla U.、Eriksson Pontus、Veerla Srinivas、De Preter Katleen、Speleman Frank、Fujii Hodaka、P?hlman Sven、Mohlin Sofie
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 499 Pages: 291~298

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2018.03.150

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Locus-specific ChIP combined with NGS analysis reveals genomic regulatory regions that physically interact with the Pax5 promoter in a chicken B cell line2017

    • Author(s)
      Fujita Toshitsugu、Kitaura Fusako、Yuno Miyuki、Suzuki Yutaka、Sugano Sumio、Fujii Hodaka
    • Journal Title

      DNA Research

      Volume: 24 Pages: 537~548

    • DOI

      10.1093/dnares/dsx023

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] in vitro engineered DNA-binding molecule-mediated chromatin immunoprecipitation (in vitro enChIP) using CRISPR ribonucleoproteins in combination with next-generation sequencing (in vitro enChIP-Seq) for the identification of chromosomal interactions2017

    • Author(s)
      Fujita Toshitsugu、Fujii Hodaka
    • Journal Title

      Bio-protocol

      Volume: 7 Pages: 1~12

    • DOI

      10.21769/BioProtoc.2612

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Biochemical analysis of 4D-Nucleome using locus-specific chromatin immunoprecipitation (locus-specific ChIP)2017

    • Author(s)
      Hodaka Fujii
    • Organizer
      第40回日本分子生物学会年会/2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
    • Invited
  • [Book] Handbook of epigenetics : the new molecular and medical genetics2017

    • Author(s)
      Tollefsbol, Trygve O.
    • Total Pages
      668
    • Publisher
      Academic Press, an imprint of Elsevier
    • ISBN
      978-0-12-805388-1
  • [Remarks] 弘前大学大学院医学研究科/医学部医学科 ゲノム生化学講座 web ページ

    • URL

      http://www.med.hirosaki-u.ac.jp/~bgb/

URL: 

Published: 2018-12-17  

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