2017 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of carcinogenesis in hepatocellular carcinoma using Nrf2-p62 double knock out mouse
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15H04917
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
柳川 徹 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (10312852)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田渕 克彦 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (20546767)
蕨 栄治 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70396612)
内田 文彦 筑波大学, 附属病院, 医員 (70736008)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | p62 / Nrf2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までに得られた臨床サンプルのデータとNrf2-p62ダブルノックアウト(DKO)マウスのフェノタイプをもとに、以下の結果を得た。
１．in vitroの解析： 1）肝クッパー細胞の貪食能を検討するため、腹腔マクロファージを採取し、蛍光ラテックスビーズの取り込みによる貪食能を測定したところ、Nrf2 ノックアウト(KO)マウス、Nrf2-p62 DKOで有意に低下を認め、また、TNFα、IL-1βなど腹腔液中の炎症性サイトカインも有意に減少していた。2）門脈からのLPSの透過性の亢進を調べるため、Caco-2細胞を用い、CRISPR/Cas9システムにより、p62、Nrf2欠損細胞を作成し単層培養して細胞膜抵抗値を測定したところp62欠損細胞では有意に他の細胞に比べて低下していた。
２．in vivoの解析：1）Nrf2-p62DKOマウスの肝臓癌の発症率を調べたところ50週齢のマウスでは12％（8/66）であったが、Nrf2単独欠損、p62KO、Nrf2KOマウスでは発生は認められなかった。2）病理学的に肝臓の異常の部位を検討したところ、DKOでは有意に線維化の割合が増大していた。
３．臨床的探索： 臨床検体を選択し、p62, LC3-A, LC3-B,の抗体を用いて免疫染色を行い、おのおのの発現の状態、臨床病態（TNM分類、分化度、局所再発、生存率など）との比較をおこない統計学的に解析したところカプランマイヤー法ではp62、LC3-A・B とも陽性例において有意に予後不良、Cox比例ハザードモデルによる疾患特異的死亡率ではLC3-A・Bが有意に予後不良であることが示唆された。
以上によって、肝臓癌の発がんについてp62欠損によるLPSの透過性の亢進が脂肪肝に作用し炎症を惹起してp62の発癌に至る可能性が示唆された。
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| Research Progress Status |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Synaptic-Adhesion Molecules Neurexin 1 and Neuroligin 1 as Novel Prognostic Factors in Oral Squamous Cell Carcinoma2018
Author(s)
Hirohata H, Yanagawa T, Takaoka H, Uchida F, Shibuya Y, Miyabe S, Tabuchi K, Akagi Y, Hasegawa S, Sakai S, Takeuchi Y, Ishibashi-Kanno N,Yamagata K, Bukawa H.
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Journal Title
J Dents Dent Med
Volume: 2
Pages: 11
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Deletion of both p62 and Nrf2 spontaneously results in the development of nonalcoholic steatohepatitis.2017
Author(s)
Akiyama K, Warabi E, Okada K, Yanagawa T, Ishii T, Kose K, Tokushige K, Ishige K, Mizokami Y, Yamagata K, Onizawa K, Ariizumi SI, Yamamoto M, Shoda J.
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Journal Title
Exp Anim
Volume: -
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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