2015 Fiscal Year Annual Research Report

新規自己免疫性難聴トランスジェニックマウスによる蝸牛イムノバイオロジーの新展開

Research Project

Project/Area Number	15H04992
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	小川郁慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00169179)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	神崎晶慶應義塾大学, 医学部, 講師 (50286556) 原田竜彦慶應義塾大学, 医学部, 講師 (60238186) 藤岡正人慶應義塾大学, 医学部, 助教 (70398626)
Project Period (FY)	2015-04-01 – 2018-03-31
Keywords	免疫学 / 耳科学 / 自己免疫 / 難聴 / 橋渡し研究 / 前庭障害
Outline of Annual Research Achievements	内耳性難聴の原因のひとつに古くから自己免疫の関与が考えられており、自己抗体や標的タンパクの同定を中心に国内外で多くの基礎的・臨床的検討がされてきている。当研究では自己免疫発症の実態である免疫寛容の破綻に焦点を当て、発生工学を駆使して新規自己免疫性難聴トランスジェニックマウスモデルを樹立し解析することとした。すなわち内耳有毛細胞に外来抗原HA（Hemagglutinin）を強制発現するトランスジェニックマウス(Tg) Math-HAを樹立した。Math-HAマウス用の外挿遺伝子作製には、Hemagglutinin (A/PR/8 H1N1 (PR8), HA512-520 ペプチド)遺伝子を米国カリフォルニア大学リバーサイド校スクリップス研究所（Monica Carlson博士）から供与を受け、内耳有毛細胞特異的遺伝子発現には過去に定評のあるMath1遺伝子J2X enhancerをUT Southwestern医学センター, Jane Johnson博士から供与を受けて用いた。さらにこのHA抗原を特異的に認識するCD4+ T細胞、CD8+T細胞を有するTg (6.5TCR,CL4-TCR)をそれぞれハーバード大学医学部のHarald von Boehmer研究室、ノースウェスタン大学Khashayarsha Khazaie博士より導入した。それぞれをMath-HAマウスと交配させたところ、前者との二重Tgは一側性低音障害から始まる変動性進行性感音難聴を、後者との二重Tgは緩徐進行性両側性高音障害型難聴を呈した。また、変動性難聴を呈する二重Tgを経時的に解析すると、難聴の進行に伴って姿勢障害、歩行障害を呈する個体が現れ、本モデルにおいては前庭機能障害を合併する可能性が示された。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 交配が想定外に進まない時期があり、その対処に時間を費やした。他方比較的高齢の二重Tgの中から前庭障害を来していると思われる個体を見出し、新たな研究の展開が期待される。
Strategy for Future Research Activity	前庭障害については新たに共同研究を策定し、眼振検査、カロリックテストで評価を進める。聴覚障害については、これまでに樹立した全自動耳音響反射システムで頻回な聴力測定による表現形の詳細な評価を行っており、引き続き推進していく。