2017 Fiscal Year Annual Research Report
Usefulness of the complex of the three regenerative elements as a therapeutic agent for regeneration against endodontic diseases
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15H05022
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
柴 秀樹 広島大学, 医歯薬保健学研究科(歯), 教授 (60260668)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鈴木 茂樹 広島大学, 病院(歯), 講師 (30549762)
小武家 誠司 広島大学, 医歯薬保健学研究科(歯), 助教 (50744794)
永安 慎太郎 広島大学, 医歯薬保健学研究科(歯), 助教 (60635192)
本山 直世 広島大学, 医歯薬保健学研究科(歯), 助教 (70509661)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 歯内療法学 / 抗菌ペプチド / LL37 / 抗炎症作用 / 歯内疾患再生治療剤 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Heparin と LL37 複合体の至適濃度比と炎症性サイトカイン産生に及ぼす影響などについて検討した。低濃度Heparin (2 microg/ml)-LL37複合体は、大腸菌に対して抗菌力を示したが、高濃度Heparin (9 microg/ml)-LL37 複合体は抗菌活性を有さなかった。低濃度Heparin (2 microg/ml)-LL37 複合体は、S. salivarius、S. mutans、S. sobrinusおよびA. actinomycetemcomitansに対しても抗菌作用を示した。一方、ヒト歯髄細胞 (hDPCs) を両複合体で刺激しても、LL37 単体刺激で見られるような顕著な細胞死は生じなかった。LL37単体と同様に、Heparin-LL37 複合体は、LPS 刺激マクロファージからの TNF-a1pha分泌量を有意に減少させた。hDPCsをLL37 単体およびHeparin-LL37 複合体で刺激し、細胞へのLL37の取り込みおよび局在を蛍光免疫染色で調べたところ、LL37単体刺激では細胞膜表面に局在しhDPCの細胞死を誘導する一方、Heparin-LL37 複合体は細胞膜表面に存在するにも関わらず、細胞の生存には影響を与えなかった。LL37で誘導される細胞死においては、Caspase 3/7活性は上昇せず、LDH 活性が上昇した。Heparin-LL37 複合体では、Heparin の濃度依存的に LDH 活性 は減少した。これらの結果から、LL37単体ではapoptosis によって細胞死が引き起こされるのではなく、LL37による細胞膜破壊による細胞障害性が Heparin によって抑制されることが示唆された。このように、Heparin-LL37 は、再生3要素球状複合体の調節因子として有用であることが明らかとなった。
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| Research Progress Status |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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