2015 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of bone metabolism in B cell-specific CD40 conditional knockoout mice
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15H06391
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
藤原 千春 大阪大学, 歯学研究科, 特任助教(常勤) (00755358)
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| Project Period (FY) |
2015-08-28 – 2017-03-31
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| Keywords | CD40 / 骨代謝 / B細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
CD40分子は免疫細胞であるB細胞上に主に発現しており、同分子を介したシグナルによりB細胞からのRANKL/OPGの産生を調節し、骨代謝に関与していることが示唆されている。一方、歯周炎病巣局所にはCD40陽性のB細胞が多数遊走・定着していることから、これらB細胞上のCD40から誘導されるシグナルが、破骨細胞の分化を活性化することで、歯槽骨破壊を引き起こすことが想定される。そこで本研究では、B細胞特異的なCD40コンディショナルノックアウトマウス (cKO) を作成し、B細胞上のCD40が骨代謝恒常性維持にどのような影響を及ぼすのか、さらに、マウス実験的歯周炎モデルを導入することで、歯周炎のような炎症状態において、B細胞のCD40が骨代謝制御に果たす役割を明らかにすることを目的として研究を行った。
BACトランスジェニックシステムを用いてCD40floxマウスを作成し、同マウスをB細胞特異的にCreリコンビナーゼを発現するマウスと交配して、B細胞特異的CD40コンディショナルノックアウトマウス (B cell CD40cKO) を樹立した。
フローサイトメーターにより、CD40floxマウスでは、脾臓B細胞、脾臓樹状細胞ともにCD40の発現を認めたが、B cell CD40cKOマウスでは脾臓B細胞におけるCD40の発現は欠失していたが、脾臓樹状細胞ではCD40の発現を認めることを確認した。
以上より、作成したマウスをB細胞特異的にCD40をノックアウトできることが確認できた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
使用するマウスのアメリカからの輸入手続きに時間を要したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、樹立したB細胞特異的CD40コンディショナルノックアウトマウス (B cell CD40cKO)とコントロールマウスのCD40floxから大腿骨を採取し、HE染色やμCTを用いて、B細胞上に発現するCD40が生理的状態下で骨代謝に及ぼす役割を解明していく。
さらに、これらのマウスの上顎第二大臼歯周囲を絹糸で結紮して歯周炎を誘導する、実験的マウス歯周病モデルを適用することで、歯周炎病巣局所における歯槽骨の吸収の程度をμCTを用いて比較検討する。それにより、歯周炎病巣局所におけるB細胞上のCD40の骨代謝に及ぼす役割を解明していく予定である。
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