2016 Fiscal Year Annual Research Report
Genetic analysis of mutations associated with polycomb repressive complex 2 in Weaver Syndrome
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15H06533
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
今川 英里 横浜市立大学, 医学研究科, 博士研究員 (60579895)
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| Project Period (FY) |
2015-08-28 – 2017-03-31
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| Keywords | Weaver症候群 / 全エクソーム解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、Weaver症候群の発症メカニズムがポリコーム蛋白質複合体2 (polycomb repressive complex 2: PRC2) 蛋白質異常に由来することの証明を目的とし、当該年度では既に遺伝学的手法(全エクソーム解析)により単離されたPRC2関連遺伝子 (SUZ12) の新生突然変異に対して、ヒストンメチル化酵素活性の評価に基づいたPRC2蛋白質機能解析を施行した。当該年度の補助金は、主に上記の研究を遂行するための試薬・物品の購入費に当てられた。
実験概要としては、SUZ12遺伝子変異に対し、PRC2のもつヒストンメチル化酵素活性によりトリメチル化される、ヒストンH3リシン27 (H3K27me3) の発現レベルを測定した。解析にはTet-onシステムを使用し、まずドキシサイクリン存在下で発現する野生型、または変異型SUZ12蛋白質を293T T-Rex細胞に安定発現させた株を作製した。次に、siRNAにより内在性SUZ12を抑制すると同時に、ドキシサイクリン刺激により野生型あるいは変異型SUZ12蛋白質を各々発現させ、H3K27me3レベルが回復するか否かのレスキュー実験を施行した。
レスキュー実験の結果、変異型蛋白質ではH3K27me3レベルが回復されないことが確認された。このことは同定された変異はPRC2複合体の機能低下を起こしていることが推測され、変異のPRC2蛋白質への影響を考える上できわめて重要な結果であった。現在までに報告がある原因遺伝子はEZH2、EEDのみであり、これら遺伝子はSUZ12と同様、PRC2関連遺伝子として知られていたが、Weaver症候群に同定された変異蛋白質の機能解析は現在までされてこなかった。そのため本研究結果は、Weaver症候群の原因がPRC2の機能喪失である可能性を、世界に先駆けて明らかにしたものである。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Mutations in genes encoding polycomb repressive complex 2 subunits cause Weaver syndrome2017
Author(s)
Eri Imagawa, Ken Higashimoto, Yasunari Sakai, Chikahiko Numakura, Nobuhiko Okamoto, Satoko Matsunaga, Akihide Ryo, Yoshinori Sato, Masafumi Sanefuji, Kenji Ihara, Yui Takada, Gen Nishimura, Hirotomo Saitsu, Takeshi Mizuguchi, Satoko Miyatake, Mitsuko Nakashima, Noriko Miyake, Hidenobu Soejima, Naomichi Matsumoto
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Journal Title
Human Mutation
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
