2016 Fiscal Year Annual Research Report
Synthesis of partial structure of glycolipid MPIase for elucidating the mechanism on membrane protein integration in the inner membrane of E. coli.
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15H06844
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| Research Institution | Suntory Foundation for Life Sciences |
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Principal Investigator |
藤川 紘樹 公益財団法人サントリー生命科学財団, 生物有機科学研究所・構造生命科学研究部, 研究員 (50755874)
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| Project Period (FY) |
2015-08-28 – 2017-03-31
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| Keywords | 糖脂質 / 膜タンパク質 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、適切に保護された単糖ユニット(グルコサミンアクセプター、グルコースドナー、フコサミンドナー)を連結し、糖鎖伸長やGlcNAc6位のAc基修飾に対応した3糖ユニットを合成した。得られた3糖をリン酸化し、ジアシルグリセロールとBn基を持ったホスホロアミダイト試薬と反応させることで、MPIaseの最小単位である3糖ピロリン脂質の合成を達成した。合成したGlcNAc6位にAc基を持つ3糖ピロリン脂質とAc基を持たない3糖ピロリン脂質を膜タンパク質膜挿入活性試験に供したところ、GlcNAc6位にAc基を持つ3糖ピロリン脂質は、天然のMPIaseの4分の1程度の活性を示したのに対して、Ac基を持たない3糖ピロリン脂質はほとんど活性を示さない結果となった。合成した3糖ピロリン脂質を用いる事で、膜タンパク質膜挿入活性には、ある程度の糖鎖長とGlcNAc6位のAc基が重要である事が明らかとなった。また、膜タンパク質膜挿入活性試験の反応液に3糖ピロリン脂質を加えた場合も、膜挿入活性が見られた。このことは、MPIaseの糖鎖部がリボソームで合成されたタンパク質と溶液中で反応し、タンパク質の凝集を抑制するシャペロン様の効果を発揮することで、膜タンパク質の膜挿入に寄与していることを示唆している。今後、より長い糖鎖を持つMPIaseやカルボン酸、リン酸、Ac基などを改変したMPIase類縁体を合成し、MPIaseの構造と膜タンパク質膜挿入活性の相関を検証していく予定である。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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