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2017 Fiscal Year Annual Research Report

<鳥類での化学物質による腎障害メカニズムの解明と腎障害バイオマーカーの探索>

Research Project

Project/Area Number 15J01937
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

石井 千尋  北海道大学, 獣医学研究科, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2015-04-24 – 2018-03-31
Keywords鳥類保全 / 腎障害 / バイオマーカー
Outline of Annual Research Achievements

鳥類は特有な生体構造を持ち、哺乳類には存在しない腎門脈が腎臓に大量の血液を運ぶため、腎臓における化学物質暴露量は多く、腎障害が起こりやすいと考えられる。しかしながら、鳥類において早期の腎障害を反映するバイオマーカーは発見されていない。そこで本研究では、鳥類の新規腎障害マーカーの探索を目的とした。
腎障害を引き起こすとされるジクロフェナク、シスプラチンをそれぞれニワトリに投与し、腎障害モデルを作成した。急性腎障害は急性間質性腎炎と急性尿細管壊死の2つに分けられ、ジクロフェナク投与では前者を、シスプラチン投与では後者を引き起こすことが哺乳類において確認されている。本実験での腎臓病理診断の結果、ニワトリにおいても上記の病態を各投与群で確認した。血液検査および各種臓器の病理検査結果から腎臓特異的な障害を持つ個体を判断し、血漿中の糖鎖解析および腎臓組織のマイクロアレイ解析・リアルタイムPCR法を用いて候補マーカーの選出を試みた。糖鎖解析の結果、ジクロフェナク投与群ではシアリル化され、かつフコシル化されていない構造を持つ糖鎖の発現が上昇した。シスプラチン投与群では発現の変動が認められず、障害を引き起こすメカニズムの違いにより、糖鎖発現に違いが現れると考えられた。
遺伝子発現を網羅的に分析するマイクロアレイ解析では、ジクロフェナク・シスプラチン投与群に共通して障害度依存的に発現が増加した遺伝子が数種類認められた。マイクロアレイ解析にて腎障害マーカー候補として考えられた数種の遺伝子を対象に、リアルタイムPCR法により定量を行うことで、さらに候補遺伝子を絞り込んだ。リアルタイムPCR法の結果から、ジクロフェナク・シスプラチン両投与群で障害度依存的に発現が増加した遺伝子に注目し、ニワトリにおいて血液中でのタンパク質発現を定量するため、オリジナル抗体を作成しタンパク質の発現解析を進めた。

Research Progress Status

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

29年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (8 results)

All 2018 2017 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (4 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] A glycomics approach to discover novel renal biomarkers in birds by administration of cisplatin and diclofenac to chickens2018

    • Author(s)
      Ishii C、Ikenaka Y、Ichii O、Nakayama S M M、Nishimura S-I、Ohashi T、Tanaka M、Mizukawa H、Ishizuka M
    • Journal Title

      Poult Sci

      Volume: 97 Pages: 1722~1729

    • DOI

      10.3382/ps/pey016

  • [Journal Article] Contamination status and accumulation characteristics of heavy metals and arsenic in five seabird species from the central Bering Sea2017

    • Author(s)
      Ishii C, Ikenaka Y, Nakayama S.M.M, Mizukawa H, Yohannes Y.B, Watanuki Y, Fukuawaka M, and Ishizuka M
    • Journal Title

      J. Vet. Med. Sci.

      Volume: 79 Pages: 807~814

    • DOI

      10.1292/jvms.16-0441

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Lead exposure in raptors from Japan and source identification using Pb stable isotope ratios2017

    • Author(s)
      Ishii Chihiro、Nakayama Shouta M.M.、Ikenaka Yoshinori、Nakata Hokuto、Saito Keisuke、Watanabe Yukiko、Mizukawa Hazuki、Tanabe Shinsuke、Nomiyama Kei、Hayashi Terutake、Ishizuka Mayumi
    • Journal Title

      Chemospher

      Volume: 186 Pages: 367~373

    • DOI

      10.1016/j.chemosphere.2017.07.143

  • [Presentation] 全国規模での鳥類への鉛曝露:曝露指標として骨の利用の可能性2017

    • Author(s)
      石井千尋,中山翔太,池中良徳,Kataba Andrew,齊藤慶輔,渡辺有希子,槇納好岐,松川岳久,久保田章乃,横山和仁,水川葉月,平田岳,石塚真由美
    • Organizer
      第23回日本野生動物医学会
  • [Presentation] Discovery of renal biomarker in birds by transcriptome analysis of kidney tissues and glycomics analysis of plasma following renal damage in chicken model2017

    • Author(s)
      Ishii, C., Ikenaka, Y., Kawai, K. Y., Ichii O., Nakayama, S. M. M., Mizukawa H., Ishizuka, M.
    • Organizer
      The 5th Sapporo Summer Seminar for One Health
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 鳥類医学の発展に向けた新規腎障害マーカーの探索2017

    • Author(s)
      石井千尋, 池中良徳, 川合佑典, 市居修, 中山翔太, 西村紳一郎, 大橋哲, 田中誠一, 齊藤慶輔, 渡邊有希子, 水川葉月, 石塚真由美
    • Organizer
      日本鳥学会2017年度大会
  • [Presentation] Discovery of renal biomarkers in birds by transcriptome analysis and glycomics analysis following kidney injury in chicken model2017

    • Author(s)
      Ishii, C., Ikenaka, Y., Kawai, K. Y., Ichii O., Nakayama, S. M. M., Mizukawa H., Ishizuka, M.
    • Organizer
      10th International Meeting of Asian Society of Conservation Medicine
    • Int'l Joint Research
  • [Remarks] 北海道大学獣医学研究院毒性学教室ホームページ

    • URL

      http://tox.vetmed.hokudai.ac.jp/category/research

URL: 

Published: 2018-12-17  

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