2015 Fiscal Year Annual Research Report
緑茶カテキンＥＧＣＧのｍｉｃｒｏＲＮＡ発現調節作用とその分子基盤の解明
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15J05716
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
山田 脩平 九州大学, 生物資源環境科学府, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2015-04-24 – 2018-03-31
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| Keywords | microRNA / EGCG / let-7b / HMGA2 / メラノーマ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
microRNAは前駆体型として転写され、プロセシングを受けることにより成熟型になることが知られている。前駆体型let-7bおよび成熟型let-7bの発現量を測定したところ、EGCGは成熟型だけでなく前駆体型let-7bの発現量も増加させた。この結果から、EGCGはlet-7bの転写を促進していることが示唆された。High mobility group A2 (HMGA2)は様々ながんで高発現し、がん細胞の増殖や浸潤を促進するがん遺伝子である。また、HMGA2はlet-7bの直接の標的遺伝子であることが知られている。メラノーマ細胞においてEGCGはHMGA2の発現を低下させた。一方、let-7bの機能を阻害するとEGCGのHMGA2発現低下作用が消失した。これらの結果から、EGCGはlet-7bを介してHMGA2の発現量を低下させることが示された。また、EGCGのlet-7b発現増加作用がin vivoにおいても発揮されるかを検討した。メラノーマ細胞を尾静脈から移植し、肺転移を誘発させた後、EGCGを投与したところ肺転移腫瘍内のlet-7b発現量が増加した。さらに、EGCGのlet-7b発現増加作用の詳細な作用メカニズムを解明するため、67LRの下流シグナル伝達分子であるcAMPおよびProtein Kinase A (PKA)の関与を検討した。cAMPの膜透過性アナログであるジブチリルcAMPの処理によりlet-7bの発現量が増加した。また、PKAの阻害剤によってEGCGのlet-7b発現増加作用が消失した。これらの結果からEGCGは67LR/cAMP/PKA/PP2A経路を介してlet-7bの発現量を増加させることが示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
当初計画していたlet-7bのプロセシングの関与、EGCGの作用に対するlet-7bの関与、in vivoにおけるEGCGのlet-7b発現調節作用の検討を予定通り実施し、結果を出すことができた。そこで、EGCGのlet-7b発現増加作用のさらに詳細なメカニズムを検討し、cAMPおよびPKAの関与を明らかにした。以上の結果を論文として発表し、Scientific Reports誌に掲載された。以上のことから、当初の計画以上に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はがん細胞だけでなくマクロファージや肝臓、血管内皮細胞、脂肪細胞など正常細胞、正常組織においてEGCGのmicroRNA発現調節作用とその分子メカニズムの解明を目指す。
メラノーマ細胞を基盤として明らかにしたEGCGのmicroRNA発現調節作用が正常細胞や正常組織においても同様に発揮されるかを評価する。メラノーマ細胞とは異なる作用がみられる場合はその作用を詳しく検討する。
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