2015 Fiscal Year Annual Research Report
二様の下垂体幹・前駆細胞ニッチを制御するｅｐｈｒｉｎ／Ｅｐｈシグナリングの解明
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15J11564
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| Research Institution | Meiji University |
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Principal Investigator |
吉田 彩舟 明治大学, 農学部, 特別研究員(PD)
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| Project Period (FY) |
2015-04-24 – 2018-03-31
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| Keywords | 下垂体 / 幹・前駆細胞 / Niche (微小環境) / 発生・分化 / ephrin/Eph signal |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、ホルモン分泌を担う下垂体前葉の機能調節機構を幹細胞という観点から解明することを目標に、下垂体幹細胞ニッチ(微小環境)の制御機構解析を目指す。
具体的には 1.幹細胞ニッチにおけるephrin-B2/Eph Receptorの解析、2.幹細胞ニッチの単離と制御因子の同定、を行う。本年度の研究成果は以下の通りである。
1.下垂体幹細胞におけるephrin-B2/Eph Receptorの解析: これまでに我々は、ephrin-B2が下垂体の幹細胞ニッチに発現していることを見出している。そこで、ephrin-B2のパートナー分子の同定を試みた。結果、ephrin-B2と結合が知られる6種類のEph分子のうち、EphB3が下垂体の幹細胞ニッチに局在することを同定した。さらに、ニッチと隣接する細胞においてEphB2が発現することを見出し、EphB3ならびにEphB2が下垂体幹細胞で発現するephrin-B2と相互作用する可能性が示唆された。また、EphB1, B2, B3, B6-quadrupleノックアウトマウス、ならびにEphB1, B3, B6-tripleノックアウトマウスを用いた解析から、ノックアウトマウスで幹細胞の増殖が低下していることを見出した。
2. 下垂体幹細胞ニッチの単離と制御分子の同定： 下垂体幹細胞ニッチで機能する分子の同定を目的に、ラット下垂体組織からニッチの単離を試みた。コラゲナーゼとトリプシンを用いた方法により、10-20程度の細胞で構成される細胞塊として、下垂体幹細胞ニッチの単離に成功した。また、網羅的な遺伝子発現解析を行うために、単離した幹細胞塊を材料としたSAGE解析用cDNA Libraryの作製に成功した。現在、次世代シークエンサーを用いた網羅的な遺伝発現解析を実施している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
下垂体組織から幹細胞ニッチを単離する方法の構築、また、それら幹細胞塊を用いた網羅的遺伝子発現解析を実施できたことから、下垂体幹細胞ニッチの制御機構解明に向けて、概ね順調に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
来年度は、現在実施している下垂体幹細胞ニッチの網羅的遺伝子発現解析の結果を踏まえ、特に受容体、細胞外マトリックス合成酵素、液性因子の遺伝子に焦点を当て、ニッチ制御因子の候補を選抜する。同定したニッチ制御因子に関しては、組織化学的な局在解析を行う。さらに、単離した実施層ニッチを用いた培養系に候補因子のリガンドを添加することにより、その機能解析を実施する。
また、下垂体幹細胞ニッチにおけるephrin-B2/EphB3, B2の解析結果に関して、原著論文の投稿を行う。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] CXCL10/CXCR3 signaling mediates inhibitory action by Interferon-Gamma on CRF-stimulated adrenocorticotropic hormone (ACTH) release2016
Author(s)
Horiguchi K, Fujiwara K, Tsukada T, Yoshida S, Higuchi M, Tateno K, Hasegawa R, Takigami S, Ohsako S, Yashiro T, Kato T, Kato Y.
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Journal Title
Cell and Tissue Research
Volume: 364
Pages: 395-404
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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