2016 Fiscal Year Research-status Report
子ども期の被ばくにおける低線量率放射線誘発腫瘍の特異性に関する研究
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15K00550
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| Research Institution | National Institutes for Quantum and Radiological Science and Technology |
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Principal Investigator |
山田 裕 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構, 放射線医学総合研究所 放射線影響研究部, チームリーダー(定常) (60192796)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森岡 孝満 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構, 放射線医学総合研究所 放射線影響研究部, 主幹研究員(定常) (70253961)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 発がん / 低線量率放射線 / 消化管腫瘍 / APC変異 / 年齢依存性 / 放射線感受性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
低線量率放射線に長期間被ばくした場合の発がん影響について、そのリスクを明らかにすることは喫緊の課題である。特に、子どもは放射線に対する感受性が高いことが知られているが、低線量率放射線による発がん影響については不明である。そこで本研究では、放射線に感受性を示すとされる消化管腫瘍モデル動物を用いて、子ども期における低線量率放射線の影響について、その線量率および照射時年齢依存性を病理学的解析により明らかにすることを目的として行った。
本年度は、ヒト家族性大腸腺腫症（FAP）のモデルであり、消化管腫瘍の自然発生が低く、放射線被ばくにより高頻度に消化管腫瘍が誘発されるC3B6F1 Min (ApcMin/+) マウスを用いて本実験を行った。すなわち高線量率（約0.5Gy/min）のガンマ線2.0Gyを生後2週齢、あるいは7週齢に照射した。また、低線量率（約0.1mGy/min）のガンマ線を生後2週齢、あるいは7週齢から2週間かけて総線量が2.0Gyになるように照射した。予備実験の結果に基づき照射後30週齢時に消化管を採取し、実体顕微鏡下で照射群および対照群における消化管腫瘍の数とサイズを計測し、その発生率を調べた。
消化管（小腸）の総ポリープ数は、2週齢時における2Gy一回照射群において対照群に比べておよそ1.5倍に増加した。しかし、7週齢時における2Gy一回照射群では増加は認められなかった。2～4週齢時における2Gy低線量率照射群においては、その発生率は対照群に比べて増加する傾向を示したが、一回照射群に比べて低くなった。また7～9週齢時における低線量率照射では、腫瘍発生率は対照群と変わらなかった。以上の結果より、Minマウスにおける放射線による消化管腫瘍の誘発は照射時年齢に依存しており、また子ども期の照射による腫瘍の誘発は線量率に依存している可能性が示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度内に本実験の照射、飼育および解剖を終了した。すなわち一群10匹(雌雄各5匹)として、高線量率ガンマ線を生後2週齢、あるいは7週齢において0.1Gy、0.5Gyおよび2.0Gy照射した。また、低線量率のガンマ線を生後2週齢、あるいは7週齢から2週間かけて総線量が0.1Gy、0.5Gyおよび2.0Gyになるように照射した(総数190匹、コントロール34匹を含む)。30週齢に達した時点で解剖し、血清を採取保存した。照射群および対照群において発生した消化管腫瘍の数を実体顕微鏡下で計数し、それらの線量効果、線量率効果および照射時年齢依存性について評価した。また腫瘍をホルマリン固定・パラフィン包埋して病理組織標本の作製を終え、デジタルスキャナーでの画像取り込みを行った。
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| Strategy for Future Research Activity |
発生した腫瘍組織の病理学的解析(組織型と悪性度の判定)を行う。悪性と診断された腫瘍組織試料より癌腫の部位をマイクロダイセクション法により切り取り、DNAを抽出する。18番染色体上のApc遺伝子の前後12箇所のマイクロサテライトマーカーのPCRを行いLOH解析する。ついで放射線誘発由来である欠失型による変異であるかどうかを明らかにするため、アレイCGH法によりゲノムコピー数異常を調べる。それら放射線誘発型の変異について線量率や照射時年齢により違いがあるか比較検討する。また採取した血液試料より血清を分離した後、その中の総脂質量を測定し、組織診断のついた腫瘍の発生率と血中総脂質量を求め、それらの線量率効果および照射時年齢依存性について評価する。
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| Causes of Carryover |
本年度は、本実験における照射、飼育と解剖、および病理標本作製に注力し、すべての試料採取と標本作製を終えることが出来たが、費用のかかる分子解析、血清試料の測定が遅れたため次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度に病理解析および分子解析を集中して効率よく進め、血清測定を外注により進めることとする。
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