2015 Fiscal Year Research-status Report
オリーブ葉ポリフェノールが魚類組織・細胞に及ぼす機能性の解明
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15K00785
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| Research Institution | Kagawa University |
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Principal Investigator |
小川 雅廣 香川大学, 農学部, 教授 (10398034)
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2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | オリーブハマチ / オレウロペイン / コラーゲン / ポリフェノール / オリーブ葉 / 線維芽細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、（１）魚体と（２）魚の培養細胞を使って実験を行った。（１）では、①オリーブ葉粉末を餌に添加して育てたハマチ（以後、オリーブハマチ）について、各部位（普通筋、肝臓、血液など）のポリフェノール（PP）代謝物の解析、②血液タンパク質とPPとの相互作用の解析、③魚消化管におけるPPの吸収を調べ、（２）では、①オリーブ葉PPの細胞毒性試験、② 細胞増殖作用に関する研究に取り組んだ。
（１）魚体を使った実験の結果：①オリーブハマチの普通筋、肝臓、血漿からの抽出物をHPLC分析した結果、オリーブ葉由来のPP及びその代謝物は検出されなかった。②ハマチの血漿の抗酸化性をDPPH法で調べたところ、オリーブハマチの血漿は、オリーブ葉粉末を含まない餌で育てたハマチ（以後、普通ハマチ）の血漿よりも3.9倍抗酸化性が高かった。オリーブ葉由来のPPが検出されなかったにもかかわらず、オリーブハマチの血漿が高い抗酸化性を示したのは、オリーブ葉PPと血漿タンパク質が結合してしまったためと推察された。③ハマチの反転腸管を使って、オリーブ葉の主要ポリフェノールであるオレウロペイン（OLP）の透過性を調べた。投与されたOLP全量の約１％が代謝を受けることなく腸管を通過していたことから、OLPは微量であるが腸管から吸収されることが示唆された。
（２）魚の培養細胞を使った実験の結果：①金魚鱗由来線維芽細胞GAKS（理研RCB1452）及びティラピア肝由来細胞Hepa-T1（理研RCB1156）に対するOLPの細胞毒性を調べた結果、線維芽細胞、肝細胞とも100μMのOLP濃度までは毒性を示さないことが分かった。
②細胞増殖作用については調べたが、現在試験を行っている最中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成27年度の研究計画は、一部結果がまだ出ていないところはあるが、ほとんど計画どおり実施した。また、当初計画よりも早く進んだ（１）については、平成28年度の研究計画に一部着手している。以上のことより、計画はほぼ達成されたといえる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、（１）魚体については、オリーブ葉PPと血漿タンパク質が相互作用してるかを調べるとともに、筋肉中のコラーゲン量やタンパク分解酵素活性を調べる。（２）魚培養細胞については、酸化ストレス耐性試験や、細胞内でのPPの代謝産物の分析、細胞内タンパク質とPPとの相互作用の解析、コラーゲン産生促進作用の解析を行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
平成27年度の研究計画は当初計画よりも早く進んだため、平成28年度の研究計画に前倒し申請（30万円）を請求して、研究を実施した。前倒し計画はほぼ順調に進んだが、前倒し計画で予想した経費よりも約４万円少ない状態で終わったため。要するに、前倒しの予算の見積もり間違いによるものである。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
残額の約４万円は、平成28年度の配分予算と一緒に、平成28年度の研究計画を実施するために使う予定である。
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