2015 Fiscal Year Research-status Report
ロイシンリッチリピートを分子骨格とした新規抗体の創出とその応用に関する基礎研究
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15K06588
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| Research Institution | National Institute of Technology, Kumamoto College |
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Principal Investigator |
吉永 圭介 熊本高等専門学校, その他部局等, 准教授 (30513238)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
橋口 周平 鹿児島大学, 工学部, 助教 (40295275)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 抗体提示の確認 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでに、LRR抗体ライブラリの設計、LRR抗体鋳型遺伝子の人工合成とファージミドベクターへの組み込み、LRR抗体鋳型タンパクの大腸菌での発現確認までが着手済みである。
平成２７年度は、ライブラリ構築に先立ち、このLRR抗体鋳型遺伝子ファージミドベクターを形質転換した大腸菌にヘルパーファージを感染、LRR抗体鋳型タンパクを表面に提示したファージを調整し、ファージ上に効率よく、抗原に接触できる形で提示されていることを解析した。
その後、ライブラリ構築に向け、ファージミドベクターDNAの大量調整、変異導入オリゴの組込み条件の検討をおこなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
校務の関係上、予定した研究時間が確保できなかったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
LRR抗体鋳型タンパクの変異導入部に、既知の結合モチーフを導入し、モデル抗原への結合活性を再現できるかを調べ、LRR抗体の提示と構造維持を詳細に検討する。
さらに、変異導入オリゴをTRIM法により人工合成し、検討した組込み条件で導入し、ライブラリ構築を進める。変異導入オリゴを１カ所導入するごとに、任意のクローンを解析し、ライブラリの質を確認する。
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| Causes of Carryover |
試薬の価格により端数が生じてしまったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
翌年度分と合わせて、試薬の購入に使用する。
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