2017 Fiscal Year Annual Research Report
Novel regenerative therapies based on injury-induced neural stem cells obtained from patients with stroke
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15K06723
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
中込 隆之 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (80434950)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松山 知弘 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (10219529)
田中 康恵 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (30723499) [Withdrawn]
吉村 紳一 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (40240353)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 脳梗塞 / 幹細胞 / 神経再生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、当大学の脳神経外科学と共同で、外減圧術のみならず、内減圧術が必要となった脳梗塞患者より梗塞巣のサンプルを採取し、ヒト由来（脳傷害/虚血誘導性幹細胞：injury/ischemia-induced neural stem cells: iNSPCs）の単離およびその特性に関して検討した。
これまでに、大脳から4例の脳梗塞巣サンプルを得ることができ、最初の2例のサンプルを中心に詳細な解析を行った。両症例とも、梗塞巣は病理組織学的に壊死に陥っていたが、免疫組織化学染色にて梗塞領域に神経幹細胞のマーカーであるnestin陽性細胞の発現を認めた。nestin陽性細胞はペリサイトマーカーであるNG2やαSMAを発現していた。梗塞巣から単離した細胞をDMEM/F12, EGF, bFGF等を添加した接着系培地で培養すると、nestinを発現する細胞の増殖を認め、それらもin vivoの所見と同様にペイサイトマーカーを発現していた。さらに、RT-PCRにて、それらの細胞はnestin以外にも、c-myc, Klf4, Sox2といった多能性幹細胞のマーカーを発現していることが確認できた。FACSにて表面マーカーを調べたところ、間葉系幹細胞（MSC）のマーカーであるCD44, CD90, CD105, CD166を発現していることが分かったが、その割合はMSCに比べて低かった。
これらの細胞を浮遊系で培養すると、neurosphere様の細胞塊を形成し、Tuj1陽性神経細胞に分化することも確認できた。また、この幹細胞は神経系以外の中杯葉系（脂肪、骨、軟骨等）にも分化することから、多能性幹細胞（ischemia-induced multipotent stem cells: iSCs）としての特性も有すると考えられた。
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[Presentation] Ischemia-induced multipotent stem cells in human cerebral infarction2018
Author(s)
Kotaro Tatebayashi, Toshinori Takagi, Akiko Nakano-Doi, Rika Sakuma, Yasue Tanaka, Saeko Kamachi, Manabu Shirakawa, Kazutaka Uchida, Hiroto Kageyama, Takayuki Nakagomi, Tomohiro Matsuyama, Shinichi Yoshimura
Organizer
International Stroke Conference 2018
Int'l Joint Research
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