シナプス接着分子SALM/Lrfnの分子機構解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K06789
• Research Institution: Ritsumeikan University
• Principal Investigator: 守村 直子 立命館大学, 総合科学技術研究機構, 研究員 (00349044)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: シナプス接着分子

Outline of Annual Research Achievements

SALM/Lrfnは、細胞外領域にロイシンリッチリピート、イムノグロブリン様構造、ファイブロネクチンIII構造およびインテグリン認識配列を有しているポストシナプスのオーファンオーガナイザーである。SALM/Lrfnファミリーについて、シナプス形成機能に共通する細胞外分子結合様式およびファミリーメンバー特異的な細胞外分子結合様式を明らかにするために、ます、SALM/Lrfn1, 2, 3, 4, 5-Fcリコンビナントタンパク質の作製を行なった。SALM/Lrfnファミリーの発現が高いマウス海馬・大脳皮質をサンプルプールとしてSALM/Lrfn細胞外領域に結合する分子をpull-down法で確認した。引き続き、分子同定が期待させるLC/MS/MS解析をに必要なサンプル作製を順次すすめている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

SALM/Lrfnファミリーの細胞外領域に結合する分子同定を行なうにあたり、HEK293T細胞を用いてSALM/Lrfn1, 2, 3, 4, 5-Fcリコンビナントタンパク質の作製を行なった。ファミリーメンバー間でタンパク質の発現量に差があり、回収量の少ないファミリーメンバーのタンパク質調製については発現ベクターの再構築など予想以上の時間がかかってしました。当初予定していたLC/MS/MS解析は次年度にまたいで行なう計画である。

Strategy for Future Research Activity

本年度のリコンビナントタンパク質の調製に時間を要してしまったため研究計画がやや遅れているが、当初の計画研究を継続して遂行する。

Causes of Carryover

LC/MS/MS解析が次年度へ引き継がれたことから、結合分子の絞り込みに必要な各種抗体にかかる費用および実験動物購入費用などの物品費の使用額が少なくなった。
各実験が現在進行中であるため、学会発表や学会参加をせず本年度旅費を使用しなかった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

当初予定より遅れているが研究計画通りにすすめているため、繰り越された物品費および旅費は次年度で使用する計画である。