2015 Fiscal Year Research-status Report
ＡＴＬの造腫瘍性をコントロールするＡＫＴシグナル：活性化と不均一性の新規制御機構
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15K06848
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| Research Institution | Miyagi Prefectural Hospital Organization Miyagi Cancer Center |
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Principal Investigator |
山口 壹範 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所), その他部局等, 研究員 (80373215)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 成人T細胞白血病 / AKT |
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| Outline of Annual Research Achievements |
難治性の血液腫瘍であるATLは、ウイルスHTLV-1の感染から数十年の潜伏期間を経て発症に至る。発症までには、ウイルス由来のがん遺伝子（Tax、HBZ）以外に宿主側のゲノム、エピゲノム異常の蓄積が必要と考えられているが、その実態は充分には明らかにされていない。申請者はこれまで、ATL由来の細胞株、TL-Om1およびST1から、極めて造腫瘍能が高いsub populationを４種、分画することに成功し、そのすべてにおいてAKTシグナルが活性化（T308とS473リン酸化の亢進）していることを見出した。本研究では、高造腫瘍性ATL細胞におけるAKT活性化の機構解明を目指す。
今年度は以下を明らかにした。
１）高造腫瘍性TL-Om1およびST1においてAKTシグナルの抑制因子であるINPP5Dの発現低下に加え、PTENの発現低下も認められた。
２）T308およびS473のリン酸化を担うキナーゼを同定するため、リン酸化への関与が報告されている各種キナーゼに対する阻害剤をATL細胞に投与し、T308およびS473リン酸化への影響を検討した。これまでにAKT阻害剤でリン酸化が低下し、自己リン酸化の可能性が示唆された。
３）AKTシグナルのレポーター遺伝子作成のため、AKT下流で発現変動する遺伝子を確認したところ、TRAILがTL-Om1、ST1で共通に変動しており、レポーター遺伝子として最も適していることが明らかになった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
高造腫瘍性ATL細胞でのAKTシグナル活性化の分子機構に関して情報が得られた。AKTをリン酸化するキナーゼの同定には至らなかったが、候補を絞ることはできた。また次年度以降に予定しているAKTシグナルに関するレポーター遺伝子作成のための遺伝子候補（INPP5D、PTEN、TRAIL）をピックアップすることができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
１）AKTの自己リン酸化を明らかにするため、AKTのノックダウンあるいはドミナントネガティブ変異体の導入を行い、影響を検討する。
２）INPP5D、PTEN、TRAILのプロモーター領域を単離し、これをもとにレポータ遺伝子を作成しTL-Om1、ST11に導入する。転写活性化に関与するエレメントの導入、および導入細胞集団における活性化の不均一性を検討し、その分子機構解明を目指す。
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| Causes of Carryover |
AKTシグナル抑制因子であるPIK3IP1の機能解析のうち、シグナル抑制性複合体解析を実施できなかったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
上記シグナル抑制性複合体実証のための免疫沈降実験などに使用する。
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[Journal Article] Xenotransplantation elicits salient tumorigenicity of adult T-cell leukemia-derived cells via aberrant AKT activation.2016
Author(s)
Yamaguchi K, Takanashi T, Nasu K, Tamai K, Mochizuki M, Satoh I, Ine S, Sasaki O, Satoh K, Tanaka N, Harigae H, Sugamura K.
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Journal Title
Cancer Sci.
Volume: ePub
Pages: ePub
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Identification of TL-Om1, an adult T-cell leukemia (ATL) cell line, as reference material for quantitative PCR for human T-lymphotropic virus 1.2015
Author(s)
Kuramitsu M, Okuma K, Yamagishi M, Yamochi T, Firouzi S, Momose H, Mizukami T, Takizawa K, Araki K, Sugamura K, Yamaguchi K, Watanabe T, Hamaguchi I.
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Journal Title
J Clin Microbiol.
Volume: 53
Pages: 587-596
DOI
Peer Reviewed
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