2016 Fiscal Year Research-status Report
SAA遺伝子変異に起因するAAアミロイド症の病理発生機序の解明
| Project/Area Number |
15K07730
|
|---|
| Research Institution | Azabu University |
|---|
Principal Investigator |
上家 潤一 麻布大学, 獣医学部, 准教授 (10400269)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | アミロイド |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
有機溶媒を用いてFFPE切片からアミロイドを抽出して質量分析計で検出する高感度検出法を確立し、生検材料のパラフィン切片一枚からのアミロイド検出を可能とした。希少疾患である豚のＡＡアミロイド症を7例解析し、アミロイド前駆タンパク質であるSAAの野生型およびＮ末端変異型が全ての症例の沈着アミロイド中に存在することを明らかにした。さらにＳＡＡのＮ末端ペプチドを用いた線維形成実験によって、変異型は野生型より線維形成能が高く、形成される線維の超微形態も異なっていた。変異型ＳＡＡで作成したアミロイド線維の存在下では野生型ＳＡＡは線維形成速度が上昇し、線維の形態も変異型に類似したものに変化した。以上から豚のＡＡアミロイド症では変異型ＳＡＡが形成するアミロイド線維をシードとして野生型ＳＡＡをアミロイド線維化する病理発生機序が示唆された。
確立した方法で犬のＡＡアミロイド症の４症例を解析した結果、豚と同様にＮ末端が異なるの2種類のＳＡＡ型が沈着していることが明らかになった。検出したそれぞれのＳＡＡ型はアミロイド線維形成能に差があり、豚と同様に線維形成能の高いＳＡＡ型が発生に重要であると考えられる。
猫の家族性ＡＡアミロイド症の症例６０症例を集め、沈着アミロイド中のＳＡＡ型を同定した。40例でアミロイドが検出され、豚、犬と同様に2種類のＳＡＡ型が同定された。猫では野生型と、配列中央部に変異がある変異型が認められた。次年度では猫で検出されたＳＡＡ型についてもアミロイド線維形成能を明らかにする。
また、上記で同定した豚、猫のＳＡＡ型のリコンビナントタンパク質を作成した。次年度は作成したタンパク質を用いて、ＡＡアミロイドモデルマウスを使ったアミロイド症惹起試験を実施する。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
猫ので同定したＳＡＡ型は、ヒトのＳＡＡで報告されている変異と一致する。猫とヒトで共通の発生機序が示唆されることから、ヒトのＡＡアミロイド症の症例の解析へと発展させる予定である。
|
| Strategy for Future Research Activity |
ＡＡアミロイド症モデルマウスに各動物種で同定したＳＡＡ型のリコンビナントタンパク質を接種し、アミロイド症惹起試験を実施する。
ヒトの症例の解析を実施するために、医学部との連携、各種倫理委員会への申請を行う。
動物種ごとに共通するＳＡＡ変異型が検出されたことから、罹患動物は変異型ＳＡＡ遺伝子を有すると考えられる。ゲノムＤＮＡを対象に変異型遺伝子の同定を行う。
|
| Causes of Carryover |
パラフィン切片を対象としたアミロイド検出法を迅速に確立することができ、使用試薬の必要量が予定より減少したため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
リコンビナントタンパク質の作成に必要な試薬を購入する。
|
