2017 Fiscal Year Annual Research Report
Preparation of functional glyco-polymers and analysis of their cellular immune activities to develop anti-pollinosis drugs
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15K07841
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
前田 恵 岡山大学, 環境生命科学研究科, 准教授 (20434988)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 糖鎖ポリマー / N-グリカン / 植物抗原性糖鎖 / HLA-DR / NFkB / Cry j1 / Cha o3 / ルイスa抗原 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
植物抗原性糖鎖の骨格構造Man3Xyl1Fuc1GlcNAc2（M3FX）によるヒトTh2免疫応答の抑制機構を解明する研究の一環として，これまでに糖鎖を多価に結合させた種々の糖鎖ポリマー（植物抗原性・ハイマンノース型・動物複合型）の作製に成功した。そこで，本年度は（1）ヒト末梢血から単離したCD14+単球をIL-4とGM-CSF存在下で6日間培養し，誘導した未熟樹状細胞を用い，糖鎖ポリマーで2日間刺激を行い，分化マーカーである（CD80，CD86，HLA-DR）の発現をフローサイトメーターにより解析した。その結果，いずれの糖鎖ポリマーについてもCD80とCD86の発現への影響は確認できなかったが，植物抗原性糖鎖ポリマーはHLA-DRの発現を抑制し，M3FXの抗原提示抑制によるTh2免疫応答抑制への関与が示唆された。（2）自然免疫応答抑制活性を解析するためマウスマクロファージ培養細胞を用いた実験を行った。マウス分泌型アルカリホスファターゼ（SEAP）のレポーター細胞株（NFkB/SEAPoter RAW細胞）を播種し，LPS存在下，各種糖鎖ポリマーによる刺激を行った。24時間後，上清を回収し，SEAPの検出を行った。その結果，いずれの糖鎖ポリマーについてもLPSによるNFkB活性化の抑制には影響しないと考えられた。（3）スギおよびヒノキ花粉の主要アレルゲン（Cry j1，Cha o3）に結合しているN-グリカンは，M3FXの非還元末端がN-アセチルグルコサミン（GlcNAc）やルイスa抗原で修飾された構造を有する。これらの植物抗原性糖鎖を多価に結合した糖鎖ポリマーの作製を目的として，タケノコ糖タンパク質からAsn糖鎖の多量調整を行った。また，（4）植物抗原性糖鎖の抗原性低下に関与するトマトα1,3/4フコシダーゼの2種遺伝子のうち未報告の遺伝子産物について論文発表を行った。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] Glycoform of a newly identified pollen allergen, Cha o 3, from Chamaecyparis obtusa (Japanese cypress, Hinoki).2017
Author(s)
Osada T, Maeda M, Tanabe C, Furuta K, Vavricka CJ, Sasaki E, Okano M, Kimura Y.
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Journal Title
Carbohydr Res.
Volume: 448
Pages: 18-23
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Presentation] Glycoform analysis of a new major allergen, Cha o3, from Japanese cypress pollen2017
Author(s)
C. Tanabe, M. Maeda, T. Osada, E. Sasaki, M. Okano, Y. Kimura
Organizer
12th Carbohydrate Bioengineering Meeting（The CBM12）, Audi Max, Augasse 2-6, 1090 Vienna/Austria
Int'l Joint Research
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