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2015 Fiscal Year Research-status Report

哺乳動物細胞の繊毛小胞形成に介在する分子機構の解明

Research Project

Project/Area Number 15K07931
Research InstitutionNara Institute of Science and Technology

Principal Investigator

小林 哲夫  奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 助教 (80433994)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2018-03-31
Keywords一次繊毛 / 繊毛小胞
Outline of Annual Research Achievements

繊毛小胞形成を制御することが知られているRab11-Rabin8-Rab8-Sec15カスケードと関与するタンパク質をプロテオミクス法により探索した。その結果、Rab11と結合する候補タンパク質として新規の低分子量GTP結合タンパク質であるpX2が同定された。そこでまず、HEK293T細胞を用いて、Rab11とpX2の相互作用を調べたところ、Rab11とpX2が共沈降することが分かり、両者の相互作用が示唆された。次に、pX2の細胞内局在を調べたところ、一次繊毛を形成していない細胞においては中心小体に局在し、一次繊毛を形成している細胞においては一次繊毛の根元部分に局在することが分かった。また、一次繊毛研究で汎用されるRPE1細胞において、pX2の発現抑制実験を行ったところ、pX2を発現抑制した細胞では有意に一次繊毛形成が抑制されたことから、pX2は一次繊毛形成に必要であることが示唆された。さらに、pX2が一次繊毛形成過程のどの段階に寄与するかを調べるために、一次繊毛形成時に中心小体から乖離するCP110の動態を調べた結果、pX2発現抑制細胞においてはCP110が中心小体に留まっていることを見出した。これらの結果から、pX2は中心小体に局在し、Rab11との相互作用を介して、一次繊毛形成の初期段階に必須の働きを担うタンパク質であることが示唆された。現在、pX2とRab11-Rabin8-Rab8-Sec15カスケードの関連を調べている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

繊毛小胞形成への介在が期待される新規タンパク質pX2の機能解析が進んだため。

Strategy for Future Research Activity

pX2による繊毛小胞形成制御を明らかにするために以下の解析を計画している。
1. pX2とRab11の結合様式と細胞内局在の解析
2. Rab11-Rabin8-Rab8-Sec15とpX2が繊毛小胞形成に与える影響の検証

  • Research Products

    (4 results)

All 2015 Other

All Presentation (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Remarks (1 results)

  • [Presentation] 膵管癌細胞における一次繊毛消失メカニズムの解析2015

    • Author(s)
      小林 哲夫、中薗 昂亮、徳田 澪、馬島 友、Brian David Dynlacht、伊東 広
    • Organizer
      第38回日本分子生物学会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド、神戸市、兵庫県
    • Year and Date
      2015-12-01 – 2015-12-04
  • [Presentation] 膵管癌細胞における一次繊毛消失機構の解析2015

    • Author(s)
      小林 哲夫、中薗 昂亮、徳田 澪、馬島 友、伊達山 泉、Brian David Dynlacht、伊東 広
    • Organizer
      第6回繊毛研究会
    • Place of Presentation
      基礎生物学研究所、岡崎市、愛知県
    • Year and Date
      2015-11-13 – 2015-11-14
  • [Presentation] Analysis of serotonin signaling mediated through primary cilia2015

    • Author(s)
      Dateyama Izumi, Tetsuo Kobayashi, Hiroshi Itoh
    • Organizer
      The 4th International Conference on Pharmacy and Advanced Pharmaceutical Sciences
    • Place of Presentation
      Yogyakarta, Indonesia
    • Year and Date
      2015-09-07
    • Int'l Joint Research
  • [Remarks] 奈良先端科学技術大学院大学バイオサイエンス研究科分子情報薬理学研究室ホームページ

    • URL

      http://bsw3.naist.jp/itoh/

URL: 

Published: 2017-01-06  

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