2015 Fiscal Year Research-status Report
神経変性疾患に対する脂質メディエータの作用機構の解明
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15K08050
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| Research Institution | Ritsumeikan University |
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Principal Investigator |
鈴木 健二 立命館大学, 薬学部, 教授 (10187726)
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2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | ミクログリア / 神経変性疾患 / 糖尿病 / ケトン体 / GPCR |
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| Outline of Annual Research Achievements |
糖尿病はアルツハイマー病やパーキンソン病などの神経変性疾患の危険因子であると考えられているが、その分子メカニズムについては不明な点が多い。本研究では、糖尿病における慢性炎症とその制御に関わる脂質メディエータ（ケトン体と長鎖脂肪酸）及び各標的タンパク質の機能に着目し、情報伝達にかかわるネットワーク構成因子を標的とした神経変性疾患に対する新たな治療方策の探索を目指す。ミクログリアによるTLR4刺激によるサイトカイン産生に対するβヒドロキシ酪酸の受容体HCA2（GPR109A）と脂肪酸結合タンパク質（FABP）の作用を分子レベルで明らかにし、免疫応答の制御と神経細胞保護機能への作用を検証する。
ミクログリア細胞株BV-2とマクロファージ様細胞RAW 264.7 を用いて、LPS刺激によって惹起される炎症性サイトカイン（TNF-α、IL-6、IFN-βなど）の発現上昇に対するナイアシンとβ-ヒドロキシ酪酸の効果を検討した。リアルタイムPCRによる各種サイトカインmRNAの定量により、低濃度のLPS刺激時にHCA2アゴニストによる抑制効果が認められた。その作用はNF-κB経路の阻害によるものであることを示すプレリミナリーな結果を得ている。p38とErk-1/2に対する効果については引き続き検討しているところである。
HCA2のGRKによるリン酸化部位であるセリン及びスレオニンをアラニンに置換した変異体を遺伝子導入した細胞による効果を現在調べている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
HCA2下流の細胞内情報伝達系の解析において､βアレスチンの効果をRNA干渉法を用いて調べる事を計画していたが、実施できていない。RT-PCRによるサイトカイン産生に対する効果とウエスタンブロッティングによる細胞内情報伝達系（NF-κBやMAPK経路）の解析に時間を要したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
RNA干渉法によりβアレスチンをノックダウンし、HCA2によるサイトカイン産生抑制に対する影響を調べる。TLR4刺激により活性化される細胞内情報伝達家とのクロストークを解析する。
各種脂肪酸結合タンパク質（FABP）の発現とHCA2刺激によるその変動をRT-PCRで調べる。
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| Causes of Carryover |
消耗品・試薬の使用が若干少なくなったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
抗体や遺伝子工学実験用試薬の代金に充当する。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] Simvastatin and atorvastatin facilitates amyloid β-protein degradation in extracellular spaces by increasing neprilysin secretion from astrocytes through activation of MAPK/Erk1/2 pathways.2016
Author(s)
Yamamoto, N., Fujii, Y., Kasahara, R., Tania, M., Ohora, K., Ono, Y., Suzuki, K. and Sobue, K.
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Journal Title
Glia
Volume: 64
Pages: 952-962
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Midazolam inhibits the formation of amyloid fibrils and GM1 ganglioside-rich microdomains in presynaptic membranes through the gamma-aminobutyric acid A receptor.2015
Author(s)
Yamamoto, N., Arima, H., Sugiura, T., Hirate, H., Kusama, N., Suzuki, K. and Sobue, K.
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Journal Title
Biochem. Biphys. Res. Commun.
Volume: 447
Pages: 547-553
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Effect of Circadian Rhythm on Clinical and Pathophysiological Conditions and Inflammation.2015
Author(s)
Kizaki, T., Sato, S., Shirato K., Sakurai, T., Ogasawara, J., Ozawa, T., Ohira, Y., Suzuki, K. and Ohio, H.
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Journal Title
Crit. Rev. Immunol.
Volume: 35
Pages: 261-275
DOI
Peer Reviewed
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