2017 Fiscal Year Annual Research Report
Functional and structural analyses of organic cation transporter in the intestine.
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15K08069
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
橋本 征也 富山大学, 大学院医学薬学研究部(薬学), 教授 (90228429)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | キニジン / 脂溶性カチオン / トランスポーター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は、ヒト腸由来Caco-2細胞とLS180細胞にH+/脂溶性カチオン対向輸送系が発現していることを明らかにしてきた。本研究では、そ の分子的実体を明らかにすることを試みた。すなわち、有機カチオンや有機アニオンを輸送することが知られているSLC22Aファミリー に着目し、未だ機能が明らかになっていない遺伝子の機能を明らかにすることを目指した。具体的には、Caco-2細胞とLS180細胞に加 え、ヒト腸由来HT29細胞においてもH+/脂溶性カチオン対向輸送系が機能していることを見出した。次に、3種類の細胞に共通して比 較的多量に発現している遺伝子がH+/脂溶性カチオン対向輸送系の分子実体である可能性が高いと考え、SLC22A遺伝子mRNAの発現量を 測定した。その結果、機能が未同定の遺伝子の中で、SLC22A15、SLC22A17、SLC22A23が3種類の培養腸上皮細胞に比較的多量に発現し ていることが明らかになった。そこで、ブタ腎臓由来LLC-PK1細胞にこれら3種類の遺伝子を強制過剰発現させ、H+/脂溶性カチオンの 輸送活性を測定した。しかし、いずれの遺伝子の強制発現細胞においてもキニジン(脂溶性カチオン)の輸送活性の有意な上昇は認め られなかった。一方、本研究では遺伝子の強制発現実験で用いたLLC-PK1細胞にも内因的にH+/脂溶性カチオン輸送系が発現していることが明らか になったことより、腎臓の尿細管上皮細胞に水溶性有機カチオンを輸送するOCTやMATEといったトランスポーター以外に、H+/脂溶性カ チオン対向輸送系が存在することが示唆された。さらに、イヌ腎由来MDCK細胞やヒト腎由来HEK293細胞にも、H+/脂溶性カチオン輸送系が発現していることが明らか になった。
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