慢性骨髄性白血病における分子標的治療薬耐性機序の解明とその耐性克服薬の開発

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08116
• Research Institution: Kinki University
• Principal Investigator: 西田 升三 近畿大学, 薬学部, 教授 (40208187)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 慢性骨髄性白血病 / イマチニブ耐性

Outline of Annual Research Achievements

本研究は慢性骨髄性白血病におけるイマチニブ耐性機序の解明と治療薬の開発を目的としている。平成27年度はイマチニブ耐性細胞を樹立し、その細胞株におけるイマチニブ耐性獲得機序の解析を行った。CGHアレイにて遺伝子発現の解析を行った結果、数種類の遺伝子発現増加を見出し、これら遺伝子発現増加が認められた因子の阻害薬を用いることで、イマチニブ耐性を克服できることを見出した。さらに、siRNAによるノックダウンでも同様の効果が認められた。これらのことからイマチニブ耐性に関わる因子を明らかにしたと考える。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成27年度においてイマチニブ耐性細胞を樹立し、イマチニブ耐性機序の解明をCGHアレイにて行い、数種類の因子が耐性に関わっている可能性を見出した。これらの因子の阻害薬及びsiRNAによるノックダウンにより、イマチニブ耐性を克服できることも見出した。また、見出した数種類の因子は薬剤排泄トランスポーターの発現調節に関わっていることが知られているため、発現解析を行ったところ、変化は認められなかった。このことは、見出した数種類の因子が薬剤排泄トランスポーターの発現には関与せず、また薬剤排泄トランスポーターもイマチニブ耐性に関与しないことを示唆している。さらに現在、見出した耐性に関与する数種類の因子がどのようにイマチニブ耐性を誘導するかを検討中である。

Strategy for Future Research Activity

平成28年度は樹立したイマチニブ耐性株の耐性機構、特にシグナル伝達因子を中心に解析を進めていく。具体的には、①同定したイマチニブ耐性因子の関与する全シグナル伝達経路の解析：平成27年度で同定した耐性因子が関与する全シグナル伝達経路を検討する。方法はLuminex200 による網羅的解析を利用したパスフェイ解析を行い、同定した因子及びその下流で活性化アしているシグナル伝達経路を同定する。また、活性化が認められたシグナル伝達経路についてはwestern blottingにて確認を行う。さらに耐性因子のsiRNA処理時においても同様に検討することで、耐性に関与する全シグナル伝達経路を明らかにする。②イマチニブ耐性に関与する因子の同定及びシグナル伝達阻害薬による耐性克服効果：①項目により同定したシグナル伝達経路阻害薬を用いることで、イマチニブ耐性が克服されるか検討する。イマチニブ単独投与時、シグナル伝達経路阻害薬単独投与時、イマチニブ＋シグナル伝達阻害薬併用時における細胞生存率を評価することで、耐性克服効果を検討する。

Research Products

• [Journal Article] RANK-RANKL interactions are involved in cell adhesion-mediated drug resistance in multiple myeloma cell lines. (2016)
  • Author(s): Tsubaki M, Takeda T, Yoshizumi M, Ueda E, Itoh T, Imano M, Satou T, Nishida S.
  • Journal Title: Tumour Biol. Volume: 37 Pages: 9099-9110
  • DOI: 10.1007/s13277-015-4761-8.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Mangiferin induces apoptosis in multiple myeloma cell lines by suppressing the activation of nuclear factor kappa B-inducing kinase. (2016)
  • Author(s): Takeda T, Tsubaki M, Kino T, Yamagishi M, Iida M, Itoh T, Imano M, Tanabe G, Muraoka O, Satou T, Nishida S.
  • Journal Title: Chem Biol Interact. Volume: 251 Pages: 26-33
  • DOI: 10.1016/j.cbi.2016.03.018.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Statins inhibited the MIP-1α expression via inhibition of Ras/ERK and Ras/Akt pathways in myeloma cells. (2016)
  • Author(s): Tsubaki M, Mashimo K, Takeda T, Kino T, Fujita A, Itoh T, Imano M, Sakaguchi K, Satou T, Nishida S.
  • Journal Title: Biomed Pharmacother. Volume: 78 Pages: 23-29
  • DOI: 10.1016/j.biopha.2015.12.017.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Statins improve survival by inhibiting spontaneous metastasis and tumor growth in a mouse melanoma model. (2015)
  • Author(s): Tsubaki M, Takeda T, Kino T, Obata N, Itoh T, Imano M, Mashimo K, Fujiwara D, Sakaguchi K, Satou T, Nishida S.
  • Journal Title: Am J Cancer Res. Volume: 5 Pages: 3186-3197
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Overexpression of survivin via activation of ERK1/2, Akt, and NF-κB plays a central role in vincristine resistance in multiple myeloma cells. (2015)
  • Author(s): Tsubaki M, Takeda T, Ogawa N, Sakamoto K, Shimaoka H, Fujita A, Itoh T, Imano M, Ishizaka T, Satou T, Nishida S.
  • Journal Title: Leuk Res. Volume: 39 Pages: 445-52
  • DOI: 10.1016/j.leukres.2015.01.016.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant